370
CINÉTIQUE ENZYMATIQUE
11.2. LIBÉRATION DU PRODUIT
AVANT LA FIN DE CYCLE CATALYTIQUE
11.2.1. Les cinétiques avec burst 2
Lorsqu'ils ont étudié l'hydrolyse du carbonate de nitrophényléthyle catalysée par la
chymotrypsine, HARTLEY et KILBY (1954) ont observé que, bien que la libération
du nitrophénolate au cours du temps est presque linéaire, l'extrapolation de la ligne
sur l'axe des y donne une ordonnée positive (figure 11.2).
Temps (min)
Nitrophénol libéré (μM)
0
30
20
10
12
8
4
0
16μM
12μM
8μM
4μM
2μM
[Chymotrypsine] (μM)
Ordonnée à l'origine (μM)
20
10
0
12
048
11.2 - Un burst de libération de produit
Les données sont celles de HARTLEY et KILBY (1954) pour l'hydrolyse du carbonate de
nitrophényléthyle catalysée par la chymotrypsine et la concentration d'enzyme est indiquée
sur chaque courbe. Les ordonnées à l'origine obtenues par extrapolation au temps zéro de
la partie linéaire de chaque courbe d'avancement sont proportionnelles et presque égales à
ces concentrations d'enzyme (insert).
Parce que le substrat n'est pas le substrat spécifique de l'enzyme et qu'il est donc
très mauvais, ils ont dû travailler avec des concentrations élevées d'enzyme, et ils
ont ainsi pu mettre en évidence que la grandeur de l'ordonnée, qui est appelée le
burst de produit, est proportionnelle à la concentration d'enzyme. Cette observation
suggère un mécanisme dans lequel les produits sont libérés en deux étapes, le
nitrophénolate étant libéré en premier :
2. Certains termes anglais sont difficiles à traduire simplement en français sans perdre
une partie de leur signification, si une terminologie complexe veut être évitée. Dans
d'autres cas, la terminologie anglaise fait partie du langage scientifique courant.
Nous avons choisi dans ces cas de conserver le terme anglais plutôt que d'utiliser
une traduction imprécise ou lourde. C'est le cas pour les termes burst, stoppedflow et quenched-flow.
CINÉTIQUE ENZYMATIQUE
11.2. LIBÉRATION DU PRODUIT
AVANT LA FIN DE CYCLE CATALYTIQUE
11.2.1. Les cinétiques avec burst 2
Lorsqu'ils ont étudié l'hydrolyse du carbonate de nitrophényléthyle catalysée par la
chymotrypsine, HARTLEY et KILBY (1954) ont observé que, bien que la libération
du nitrophénolate au cours du temps est presque linéaire, l'extrapolation de la ligne
sur l'axe des y donne une ordonnée positive (figure 11.2).
Temps (min)
Nitrophénol libéré (μM)
0
30
20
10
12
8
4
0
16μM
12μM
8μM
4μM
2μM
[Chymotrypsine] (μM)
Ordonnée à l'origine (μM)
20
10
0
12
048
11.2 - Un burst de libération de produit
Les données sont celles de HARTLEY et KILBY (1954) pour l'hydrolyse du carbonate de
nitrophényléthyle catalysée par la chymotrypsine et la concentration d'enzyme est indiquée
sur chaque courbe. Les ordonnées à l'origine obtenues par extrapolation au temps zéro de
la partie linéaire de chaque courbe d'avancement sont proportionnelles et presque égales à
ces concentrations d'enzyme (insert).
Parce que le substrat n'est pas le substrat spécifique de l'enzyme et qu'il est donc
très mauvais, ils ont dû travailler avec des concentrations élevées d'enzyme, et ils
ont ainsi pu mettre en évidence que la grandeur de l'ordonnée, qui est appelée le
burst de produit, est proportionnelle à la concentration d'enzyme. Cette observation
suggère un mécanisme dans lequel les produits sont libérés en deux étapes, le
nitrophénolate étant libéré en premier :
2. Certains termes anglais sont difficiles à traduire simplement en français sans perdre
une partie de leur signification, si une terminologie complexe veut être évitée. Dans
d'autres cas, la terminologie anglaise fait partie du langage scientifique courant.
Nous avons choisi dans ces cas de conserver le terme anglais plutôt que d'utiliser
une traduction imprécise ou lourde. C'est le cas pour les termes burst, stoppedflow et quenched-flow.