6 – RÉACTIONS À PLUSIEURS SUBSTRATS
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commun : elle a lieu avec au moins une paire de substrat-produit dans tous les
mécanismes ordonnés. Pour les mécanismes que nous venons de discuter, par
exemple, Q doit être un substrat anti-compétitif vis-à-vis de A et de B, parce que,
en absence de P et de R, tous les profils de KING et ALTMAN présentant une dépendance en [Q renferment également le produit [] []
AB . De manière similaire, R
doit être un substrat anti-compétitif vis-à-vis de C.
Cette brève discussion de quelques points importants dans l'étude des mécanismes
d'enzymes à trois substrats, ne peut être considérée autrement que comme une
simple introduction au vaste sujet que ces mécanismes constituent. Pour plus
d'information, nous vous renvoyons à des revues spécialisées comme celle de
WONG et HANES (1969) et celle de DALZIEL (1969). DIXON et WEBB (1979)
discutent de l'utilisation d'échange d'isotopes (§ 6.7) dans le cas de réactions à trois
substrats, bien que les commentaires de DALZIEL (1969), concernant des sources
possibles d'erreur, doivent être pris en compte.
L'analyse des réactions à quatre substrats a été introduite par ELLIOTT et TIPTON
(1974). Elle suit des principes similaires à celle des réactions à trois substrats.
Tableau 6.5 - Constantes apparentes pour un exemple
de mécanisme à trois substrats
app
V
V
app
K m
app
K m
app
A
V 1 [B][C]
K mC [B]+ K mB [C]+ [B][C]
V 1 [B]
K AB + K mA [B]
K AB + K mA [B] [C]
K mC [B]+ K mB [C]+ [B][C]
B
V 1 [A][C]
K mC [A]+ K mA [C]+ [A][C]
V 1 [A]
K AB + K mB [A]
K AB + K mB [A] [C]
K mC [A]+ K mA [C]+ [A][C]
C
V 1 [A][B]
K AB + K mB [A]+ K mA [B]+ [A][B]
V 1
K mC
K mC [A][B]
K AB + K mB [A]+ K mA [B]+ [A][B]
Substrat
variable
(
(
)
)
Ce tableau donne les expressions pour les valeurs apparentes des paramètres de l'équation
de MICHAELIS et MENTEN pour une réaction à trois substrats qui obéit à l'équation [6.59]
PROBLÈMES
6.1 - L'hydrolyse progressive de la liaison α (1 → 4) glucosidique de l'amylose
est catalysée par deux enzymes, l'a-amylase et la b-amylase. Dans le cas
de l'a-amylase, le nouveau groupe réduit obtenu adopte la même
configuration α (avant une mutarotation) que celle rencontrée dans le
polymère de départ. Par contre, dans le cas de la b-amylase, le nouveau
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commun : elle a lieu avec au moins une paire de substrat-produit dans tous les
mécanismes ordonnés. Pour les mécanismes que nous venons de discuter, par
exemple, Q doit être un substrat anti-compétitif vis-à-vis de A et de B, parce que,
en absence de P et de R, tous les profils de KING et ALTMAN présentant une dépendance en [Q renferment également le produit [] []
AB . De manière similaire, R
doit être un substrat anti-compétitif vis-à-vis de C.
Cette brève discussion de quelques points importants dans l'étude des mécanismes
d'enzymes à trois substrats, ne peut être considérée autrement que comme une
simple introduction au vaste sujet que ces mécanismes constituent. Pour plus
d'information, nous vous renvoyons à des revues spécialisées comme celle de
WONG et HANES (1969) et celle de DALZIEL (1969). DIXON et WEBB (1979)
discutent de l'utilisation d'échange d'isotopes (§ 6.7) dans le cas de réactions à trois
substrats, bien que les commentaires de DALZIEL (1969), concernant des sources
possibles d'erreur, doivent être pris en compte.
L'analyse des réactions à quatre substrats a été introduite par ELLIOTT et TIPTON
(1974). Elle suit des principes similaires à celle des réactions à trois substrats.
Tableau 6.5 - Constantes apparentes pour un exemple
de mécanisme à trois substrats
app
V
V
app
K m
app
K m
app
A
V 1 [B][C]
K mC [B]+ K mB [C]+ [B][C]
V 1 [B]
K AB + K mA [B]
K AB + K mA [B] [C]
K mC [B]+ K mB [C]+ [B][C]
B
V 1 [A][C]
K mC [A]+ K mA [C]+ [A][C]
V 1 [A]
K AB + K mB [A]
K AB + K mB [A] [C]
K mC [A]+ K mA [C]+ [A][C]
C
V 1 [A][B]
K AB + K mB [A]+ K mA [B]+ [A][B]
V 1
K mC
K mC [A][B]
K AB + K mB [A]+ K mA [B]+ [A][B]
Substrat
variable
(
(
)
)
Ce tableau donne les expressions pour les valeurs apparentes des paramètres de l'équation
de MICHAELIS et MENTEN pour une réaction à trois substrats qui obéit à l'équation [6.59]
PROBLÈMES
6.1 - L'hydrolyse progressive de la liaison α (1 → 4) glucosidique de l'amylose
est catalysée par deux enzymes, l'a-amylase et la b-amylase. Dans le cas
de l'a-amylase, le nouveau groupe réduit obtenu adopte la même
configuration α (avant une mutarotation) que celle rencontrée dans le
polymère de départ. Par contre, dans le cas de la b-amylase, le nouveau