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CINÉTIQUE ENZYMATIQUE
Pour le mécanisme aléatoire à complexe ternaire dans des conditions d'équilibre,
l'équation de vitesse complète [6.22], se simplifie aussi sous la forme de l'équation
[6.24] si les termes en [] P et [] Q sont omis. Donc les graphiques primaires sont
les mêmes que ceux du mécanisme ordonné et il est impossible de déterminer à
partir des mesures de vitesse initiale en absence de produit s'il existe un ordre
obligatoire de fixation des substrats.
(K mA – K iA )/V
[A]/v
[A]
– K iA
0
10
10
2
1
0,5
0,5
V/(K mA – K iA )
1 – K mA /K iA )
V
v
v/[A]
0
1/V(1 – K mA /K iA )
1/v
1/[A]
– 1/K iA
0
10
2
1
0,5
6.13 - Graphiques primaires pour des mécanismes séquentiels
(sans tenir compte de la possible inhibition par le substrat)
Les droites sont marquées par les valeurs de [ B ]/K mB (certaines valeurs sont omises pour
éviter de surcharger la figure ; la série complète des valeurs est la suivante : 0,5 ; 1 ; 2 ; 3 ;
5 ; 10). L'apparence de chacun des trois graphiques linéaires couramment utilisés est
présentée dans la figure. Les graphiques primaires sont qualitativement similaires lorsque
[ B ] est modifieés pour plusieurs valeurs de [ A ].
6.5.4. Les graphiques secondaires
L'analyse secondaire des données permet de déterminer les valeurs réelles des
différents paramètres. Puisque les équations [6.29] et [6.31] ont la forme d'équations de MICHAELIS et MENTEN, les graphiques de V
app
ou de VK
app
m
app en
fonction de [] B décrivent des hyperboles rectangulaires passant par l'origine, qui
peuvent être analysées en utilisant les graphiques linéaires habituels. Ces graphiques sont alors appelés graphiques secondaires puisqu'ils représentent un
traitement supplémentaire des paramètres apparents obtenus à partir des graphiques
primaires. Par exemple, les pentes des graphiques primaires de [] Av en fonction
de [] A (ou des ordonnées à l'origine des graphiques de 1 v en fonction de