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CINÉTIQUE ENZYMATIQUE
C-A
U-A
G-A
A-A
A-G
A-C
A-U
K m (mM)
1,00
1,03
1,10
0,803 0,437
0,495
2,61
V (μM min
–1 )
11,5
10,4
8,78
13,2
9,81
11,6
11,8
En supposant que le comportement des liaisons dans les monophosphates de dinucléotide est représentatif de celui des mêmes types de
liaisons dans l’ARN, quel type de liaison (des sept présentés) serait
hydrolysé le plus rapidement durant la digestion de l’ARN par l’enzyme ?
5.7 - Les données suivantes se rapportent à l’hydrolyse de différents tripeptides
libérant l’acide aminé N-terminal et le dipeptide C-terminal, catalysée par
l’aminotripeptidase de l’intestin à pH 7,0 et 37°C (données de DOUMENG et
MAROUX, 1979) :
Substrat
k 0 (s
–1
)
K m (mM)
L-Pro-Gly-Gly
385
1,3
L-Leu-Gly-Gly
190
0,55
L-Ala-Gly-Gly
365
1,4
L-Ala-L-Ala-L-Ala
298
0,52
a - Quel substrat serait hydrolysé le plus rapidement dans les premiers
instants de la réaction si un échantillon d’enzyme est ajouté à un
mélange des quatre substrats à des concentrations équimolaires ?
b - Quand L-Ala-Gly-Gly est étudié en tant qu’inhibiteur de l’hydrolyse de
L-Pro-Gly-Gly, une constante d’inhibition compétitive de 1,4 mM est
mesurée. Cette valeur est-elle en accord avec l’idée que l’enzyme
comporte un seul site actif où les deux substrats sont hydrolysés ?
5.8 - Pour un rapport donné de concentration d’inhibiteur sur la constante
d’inhibition appropriée, une inhibition compétitive réduit plus fortement
la vitesse qu’une inhibition anti-compétitive si la concentration de substrat est inférieure au K m ; l’inverse est vrai si la concentration de substrat
est supérieure au K m . Démontrer cette relation de manière algébrique et
l'expliquer conceptuellement, c’est-à-dire sans faire référence à l’algèbre.
5.9 - Si deux inhibiteurs I et J agissent comme des inhibiteurs compétitifs
avec des constantes d’inhibition données respectivement par K i et K j
quand ils sont étudiés séparément, leur effet combiné lorsqu’ils sont
présents simultanément peut être exprimé par une équation du type de
celle-ci :
v
VA
K
I
K
J
K
J
K
A
m
ij
j
=
++
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟ +
⎡
⎣
⎢
⎢
⎤
⎦
⎥
⎥
+
[]
[]
[]
'
[]
'
[]
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CINÉTIQUE ENZYMATIQUE
C-A
U-A
G-A
A-A
A-G
A-C
A-U
K m (mM)
1,00
1,03
1,10
0,803 0,437
0,495
2,61
V (μM min
–1 )
11,5
10,4
8,78
13,2
9,81
11,6
11,8
En supposant que le comportement des liaisons dans les monophosphates de dinucléotide est représentatif de celui des mêmes types de
liaisons dans l’ARN, quel type de liaison (des sept présentés) serait
hydrolysé le plus rapidement durant la digestion de l’ARN par l’enzyme ?
5.7 - Les données suivantes se rapportent à l’hydrolyse de différents tripeptides
libérant l’acide aminé N-terminal et le dipeptide C-terminal, catalysée par
l’aminotripeptidase de l’intestin à pH 7,0 et 37°C (données de DOUMENG et
MAROUX, 1979) :
Substrat
k 0 (s
–1
)
K m (mM)
L-Pro-Gly-Gly
385
1,3
L-Leu-Gly-Gly
190
0,55
L-Ala-Gly-Gly
365
1,4
L-Ala-L-Ala-L-Ala
298
0,52
a - Quel substrat serait hydrolysé le plus rapidement dans les premiers
instants de la réaction si un échantillon d’enzyme est ajouté à un
mélange des quatre substrats à des concentrations équimolaires ?
b - Quand L-Ala-Gly-Gly est étudié en tant qu’inhibiteur de l’hydrolyse de
L-Pro-Gly-Gly, une constante d’inhibition compétitive de 1,4 mM est
mesurée. Cette valeur est-elle en accord avec l’idée que l’enzyme
comporte un seul site actif où les deux substrats sont hydrolysés ?
5.8 - Pour un rapport donné de concentration d’inhibiteur sur la constante
d’inhibition appropriée, une inhibition compétitive réduit plus fortement
la vitesse qu’une inhibition anti-compétitive si la concentration de substrat est inférieure au K m ; l’inverse est vrai si la concentration de substrat
est supérieure au K m . Démontrer cette relation de manière algébrique et
l'expliquer conceptuellement, c’est-à-dire sans faire référence à l’algèbre.
5.9 - Si deux inhibiteurs I et J agissent comme des inhibiteurs compétitifs
avec des constantes d’inhibition données respectivement par K i et K j
quand ils sont étudiés séparément, leur effet combiné lorsqu’ils sont
présents simultanément peut être exprimé par une équation du type de
celle-ci :
v
VA
K
I
K
J
K
J
K
A
m
ij
j
=
++
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟ +
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⎢
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