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CINÉTIQUE ENZYMATIQUE
cinétiques apparentes pour plusieurs concentrations d’inhibiteur en utilisant les
méthodes décrites dans le § 3.5, et ensuite de tracer les graphiques de KV m
app
app
et
de 1 V
app
en fonction de [I]. Dans chaque cas, le résultat devrait être une droite,
qui croise l’axe des [] I à une valeur égale à – K ic dans le graphique où KV m
app
app
est représenté et qui croise l’axe des [] I à une valeur égale à – K iu dans le
graphique où 1 V
app
est représenté. Il peut sembler plus naturel de déterminer la
valeur de – K ic en portant en graphique K m
app en fonction de [] I plutôt que
KV m
app
app
, mais cette pratique n’est pas recommandable pour deux raisons. Elle
est seulement valable si l’inhibition est compétitive et elle donne une courbe plutôt
qu’une droite si l’inhibition est mixte ; même si l’inhibition est strictement compétitive, cette représentation est beaucoup moins précise puisque la valeur de K m
app
ne peut jamais être estimée aussi précisément que celle de KV m
app
app
.
Une autre méthode permettant d’estimer K ic , introduite par DIXON (1953), est aussi
couramment utilisée. L’équation complète pour l’inhibition mixte peut être écrite
de la manière suivante :
v
VA
K
I
K
A
I
K
m
ic
iu
=
+
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟ ++
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟
[]
[] []
[]
11
[5.14]
En prenant la réciproque des deux côtés de l’équation et en introduisant les indices
1 et 2 pour distinguer les mesures réalisées à deux concentrations différentes de
substrat, [A] 1 et [A] 2 , nous obtenons les deux équations :
1
1
1
1
1
1
v
KA
VA
I
K
K
A
K
VA
m
m
ic
iu
=
+
+
+
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟
[]
[]
[]
[]
[]
[5.15]
1
2
2
2
2
2
v
KA
VA
I
K
K
A
K
VA
m
m
ic
iu
=
+
+
+
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟
[]
[]
[]
[]
[]
[5.16]
Ces deux équations indiquent que le graphique de 1 v en fonction de [] I à une
valeur constante de [] A est une droite. Si deux de ces droites sont dessinées, à
partir de mesures réalisées à deux concentrations différentes de A, le point
d’intersection peut être déterminé en fixant 11 12
vv =
:
KA
VA
I
K
K
A
K
VA
KA
VA
I
K
K
A
K
VA
m
m
ic
iu
m
m
ic
iu
+
+
+
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟
=
+
+
+
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟
[]
[]
[]
[]
[]
[]
[]
[]
[]
[]
1
1
1
1
2
2
2
2
[5.17]
ou
K
VA
A
I
K
m
ic
11
10
12
[]
– []
[]
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟ +
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟ =
[5.18]
et ainsi, [] IK ic
=−
et 1
1
v
KK
V
ic
iu
=
–(
) au point d’intersection.
CINÉTIQUE ENZYMATIQUE
cinétiques apparentes pour plusieurs concentrations d’inhibiteur en utilisant les
méthodes décrites dans le § 3.5, et ensuite de tracer les graphiques de KV m
app
app
et
de 1 V
app
en fonction de [I]. Dans chaque cas, le résultat devrait être une droite,
qui croise l’axe des [] I à une valeur égale à – K ic dans le graphique où KV m
app
app
est représenté et qui croise l’axe des [] I à une valeur égale à – K iu dans le
graphique où 1 V
app
est représenté. Il peut sembler plus naturel de déterminer la
valeur de – K ic en portant en graphique K m
app en fonction de [] I plutôt que
KV m
app
app
, mais cette pratique n’est pas recommandable pour deux raisons. Elle
est seulement valable si l’inhibition est compétitive et elle donne une courbe plutôt
qu’une droite si l’inhibition est mixte ; même si l’inhibition est strictement compétitive, cette représentation est beaucoup moins précise puisque la valeur de K m
app
ne peut jamais être estimée aussi précisément que celle de KV m
app
app
.
Une autre méthode permettant d’estimer K ic , introduite par DIXON (1953), est aussi
couramment utilisée. L’équation complète pour l’inhibition mixte peut être écrite
de la manière suivante :
v
VA
K
I
K
A
I
K
m
ic
iu
=
+
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟ ++
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟
[]
[] []
[]
11
[5.14]
En prenant la réciproque des deux côtés de l’équation et en introduisant les indices
1 et 2 pour distinguer les mesures réalisées à deux concentrations différentes de
substrat, [A] 1 et [A] 2 , nous obtenons les deux équations :
1
1
1
1
1
1
v
KA
VA
I
K
K
A
K
VA
m
m
ic
iu
=
+
+
+
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟
[]
[]
[]
[]
[]
[5.15]
1
2
2
2
2
2
v
KA
VA
I
K
K
A
K
VA
m
m
ic
iu
=
+
+
+
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟
[]
[]
[]
[]
[]
[5.16]
Ces deux équations indiquent que le graphique de 1 v en fonction de [] I à une
valeur constante de [] A est une droite. Si deux de ces droites sont dessinées, à
partir de mesures réalisées à deux concentrations différentes de A, le point
d’intersection peut être déterminé en fixant 11 12
vv =
:
KA
VA
I
K
K
A
K
VA
KA
VA
I
K
K
A
K
VA
m
m
ic
iu
m
m
ic
iu
+
+
+
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟
=
+
+
+
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟
[]
[]
[]
[]
[]
[]
[]
[]
[]
[]
1
1
1
1
2
2
2
2
[5.17]
ou
K
VA
A
I
K
m
ic
11
10
12
[]
– []
[]
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟ +
⎛
⎝
⎜
⎞
⎠
⎟ =
[5.18]
et ainsi, [] IK ic
=−
et 1
1
v
KK
V
ic
iu
=
–(
) au point d’intersection.