Chapitre II
Matériel et Méthodes
26
Principe : Ensemencement par incorporation dans un milieu gélosé non sélectif à partir de la
solution mère et des 4 solutions filles préalablement préparées.
Mode opératoire :
A partir des dilutions effectuées (10
-1 , 10
-2 , 10
-3 , 10
-4 , 10
-5
) et à l’aide d’une pipette Pasteur
stérile, porter aseptiquement et répartir, 1 ml dans une boite de pétrie stérile, couler 15ml de
contenant de la gélose PCA (Plat Count Agar) et répartir en dessinant un huit pour permettre à
l’inoculum de se mélanger à la gélose. Laisser solidifier, après solidification incubé à 30°C
pendant 72h.
Lecture et dénombrement :
Les colonies caractéristiques de la FMAT sur la PCA sont blanches et de forme lenticulaire.
L’unité de dénombrement est l’UFC/g, car une colonie observable sur la surface du milieu
gélosé est le résultat de l’accumulation et/ou l’association de plusieurs microorganismes.
Les boites contenantes entre 30 et 300 colonies sont considérées comme dénombrables.
(Nnenna, et al., 2021)
Le nombre de germes par gramme de produit (N) est obtenu selon la formule suivante :
N=
∑í µí°¶
í µí±(í µí±1+0.1í µí±2)×í µí±
N= nombre de germes par gramme de produit
∑C= somme des colonies caractéristiques sur les deux boites retenues
V= volume de l’inoculum appliqué à chaque boite (en ml)
d= taux de dilution correspondant à la première dilution retenue
n1= nombre de boite retenue à la 1
ere dilution (la plus faible)
n2= nombre de boite retenue à la 2
nd dilution (la plus forte)
Matériel et Méthodes
26
Principe : Ensemencement par incorporation dans un milieu gélosé non sélectif à partir de la
solution mère et des 4 solutions filles préalablement préparées.
Mode opératoire :
A partir des dilutions effectuées (10
-1 , 10
-2 , 10
-3 , 10
-4 , 10
-5
) et à l’aide d’une pipette Pasteur
stérile, porter aseptiquement et répartir, 1 ml dans une boite de pétrie stérile, couler 15ml de
contenant de la gélose PCA (Plat Count Agar) et répartir en dessinant un huit pour permettre à
l’inoculum de se mélanger à la gélose. Laisser solidifier, après solidification incubé à 30°C
pendant 72h.
Lecture et dénombrement :
Les colonies caractéristiques de la FMAT sur la PCA sont blanches et de forme lenticulaire.
L’unité de dénombrement est l’UFC/g, car une colonie observable sur la surface du milieu
gélosé est le résultat de l’accumulation et/ou l’association de plusieurs microorganismes.
Les boites contenantes entre 30 et 300 colonies sont considérées comme dénombrables.
(Nnenna, et al., 2021)
Le nombre de germes par gramme de produit (N) est obtenu selon la formule suivante :
N=
∑í µí°¶
í µí±(í µí±1+0.1í µí±2)×í µí±
N= nombre de germes par gramme de produit
∑C= somme des colonies caractéristiques sur les deux boites retenues
V= volume de l’inoculum appliqué à chaque boite (en ml)
d= taux de dilution correspondant à la première dilution retenue
n1= nombre de boite retenue à la 1
ere dilution (la plus faible)
n2= nombre de boite retenue à la 2
nd dilution (la plus forte)