Matériel et méthodes
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II.3.5. Détermination de la teneur en sucres totaux (méthode DUBOIS modifiée)
La teneur en sucres totaux a été déterminée par dosage colorimétrique, les sucres et leurs
dérivés méthylés réagissent avec le phénol et l’acide sulfurique concentré pour donner un
produit de coloration jaune orangé stable pendant plusieurs heures (DUBOIS et aln1956).
Mode opératoire : (Figure 11)
- Préparer une série de tubes énumérés ;
- Dissoudre l’échantillon de poudre de carapaces de crevettes dans de l’eau distillée.
- Ajouter des volumes graduels de solution de saccharose ;
- Compléter avec de l’eau distillée jusqu’à l’obtention d’un volume final constant ;
- Ajouter une solution de phénol à 80 % ;
- Ajouter de l’acide sulfurique à 95% massique ;
- Laisser les tubes au repos 10 minutes, puis agiter et placer pendant 10 à 20 minutes à
une température de 30°C ;
- Prélever une partie de la solution contenue dans les tubes à essais afin de remplir la
cuvette photospectrométrique aux trois quarts ;
- Mesurer l’absorbance à la longueur d’onde de 490 nm.
Lecture :
Les valeurs obtenues permettent de tracer la courbe d’étalonnage des absorbances en fonction
des concentrations en sucres, A= f [sucres totaux]. Cette dernière permet la détermination de
la teneur en sucres totaux.
Figure 11. Préparation de la gamme étalon.