Matériel et méthodes
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- Repeser le ballon.
La teneur en lipide est déterminée à l’aide de l’équation suivante :
(II.3.3)
L (%) : La teneur en lipides totaux ;
P0 : Le poids du ballon vide avant extraction
P1 : Le poids du ballon après extraction
II.3.4. Détermination de la teneur en protéines totales
La teneur en protéines a été déterminée par dosage colorimétrique, selon la méthode de
Biuret, les liaisons peptidiques réagissent avec les ions cuivriques (provenant du sulfate de
cuivre, un réactif de la réaction) et forment un complexe de coloration bleue-violacée en
milieu alcalin.
Mode opératoire :
- Préparer une série de tubes énumérés ;
- Préparer une solution mère de BSA à 1 % ;
- Dissoudre l’échantillon (poudre de carapaces de crevettes) dans un volume déterminé
d’eau distillée ;
- Ajouter dans les tubes des volumes graduels de solution de BSA ;
- Compléter avec de l’eau distillée jusqu’à volume final constant et bien mélanger ;
- Ajouter 1 ml de solution de NAOH ;
- Ajouter un volume déterminé du réactif de Biuret ;
- Incuber à température ambiante de 30 à 90min ;
- Prélever une partie de la solution contenue dans les tubes à essais afin de remplir la
cuvette photospectrométrique aux trois quarts ;
- Mesurer l’absorbance à la longueur d’onde de 545 nm.
Lecture :
Les valeurs obtenues permettent de tracer la courbe d’étalonnage des absorbances en fonction
des concentrations en protéines, A= f [protéines]. Cette dernière permet la détermination de la
teneur totale en protéines des carapaces de crevettes étudiées.