II. Matériel et méthodes ………………………………………………………….. .14
II.1. Cadre de l’étude …..............................................................................................14
II.2. Matériel biologique…………………………………………………………….14
II.3. Préparation de la solution mère et des dilutions…………………….……….15
II.4. Recherche des entérocoques ………………...…………………….……….….16
II.4.1. Principe………………………………………….....……….………….16
II.4.2. Culture sur le milieu de Roth ……………………………………….....16
A) Principe……………...…………………………………………….16
B) Mode opératoire ……………...………………………………... ...17
C) Lecture ………………………………………………………...….18
II.4.3. Test confirmatif sur le milieu Litsky………………………………......18
A) Principe ……………………………………………………….......18
B) Mode opératoire……………………………………………..….....18
C) Lecture ………………………………………………………..…..18
II.4.4. La conservation des souches…………………………………….…......19
II.4.4.1. Conservation des souches sur milieu BEA en gélose inclinée..…. .....19
II.4.4.2. Conservation des souches sur milieu de Litsky au glycérol…….... .....19
II.5. Croissance des entérocoques sur les milieux hostiles……………………........20
II.5.1. Isolement sur la gélose BEA……………………………………..….....20
A) Principe……………………………………………………..….......20
B) Mode opératoire………………………………………….……......20
C) Lecture ………………………………………………….………...20
II.5.2. Croissance sur PCA (Plat Count Agar) à 6,5% NaCl……………........21
A) Principe ……………………………………………….………......21
B) Mode opératoire……………………………………………….......21
C) Lecture………………………………………...……………….......21
II.5.3. Croissance aux températures de 10
0
C et de 44
0
C……………….. ….....22
A) Mode opératoire………………………………………………........22
B) Lecture…………………………………………………………......22
II.5.4. Croissance dans le milieu V .L.G. à pH=9,6 …......................................... 22
II.6. Techniques d’identification………………………………..………………......23