Partie II : Matériel et méthodes
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II.3. Croissance des entérocoques sur les milieux hostiles
II.3.1. Isolement sur la gélose BEA
A). Principe
La gélose à la bile, à l’esculine et à l’azide de sodium (BEA) est un milieu sélectif utilisé
pour l’isolement et le dénombrement des entérocoques dans les produits alimentaires.
C’est un milieu sélectif des stréptocoques peu exigants, il contient la bile de bœuf qui
inhibe la flore à Gram positif et certaines bactéries à Gram négatif, alors que l’azide de
sodium inhibe les bactéries à Gram positif et tous les stroptocoques sauf les entérocoques.
Ce milieu favorise la croissance des entérocoques qui hydrolysent le glucoside l’ésculine
en glucose et en ésculitine. Cette derniére forme avec les ions de fer (III) un complexe noir
caractéristique des entérocoques.
B). Mode opératoire
Prélever, à l’aide d’une anse bouclée passée à la flamme, un inoculum dans chaque tube
conservé après la décongelation en est repiqué par stries à la surface de la gélose BEA,
incuber dans un étuve à une temperature 37°C pendant 24 à 48 heure.(voir Figure N
o 11).
C). Lecture
Les entéroque se présentent sous forme de petites colonies translucides entourées d’un halo
noir, les staphylocoques et les levures peuvent donner des colonies opaques sans halo noir.
Il est indispensable d’identifier les microorganismes suspects, notamment pour écarter
toute confusion avec les listeria qui peuvent donner des colonies similaires à celles des
entérocoques (Dellaras, 2007).
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II.3. Croissance des entérocoques sur les milieux hostiles
II.3.1. Isolement sur la gélose BEA
A). Principe
La gélose à la bile, à l’esculine et à l’azide de sodium (BEA) est un milieu sélectif utilisé
pour l’isolement et le dénombrement des entérocoques dans les produits alimentaires.
C’est un milieu sélectif des stréptocoques peu exigants, il contient la bile de bœuf qui
inhibe la flore à Gram positif et certaines bactéries à Gram négatif, alors que l’azide de
sodium inhibe les bactéries à Gram positif et tous les stroptocoques sauf les entérocoques.
Ce milieu favorise la croissance des entérocoques qui hydrolysent le glucoside l’ésculine
en glucose et en ésculitine. Cette derniére forme avec les ions de fer (III) un complexe noir
caractéristique des entérocoques.
B). Mode opératoire
Prélever, à l’aide d’une anse bouclée passée à la flamme, un inoculum dans chaque tube
conservé après la décongelation en est repiqué par stries à la surface de la gélose BEA,
incuber dans un étuve à une temperature 37°C pendant 24 à 48 heure.(voir Figure N
o 11).
C). Lecture
Les entéroque se présentent sous forme de petites colonies translucides entourées d’un halo
noir, les staphylocoques et les levures peuvent donner des colonies opaques sans halo noir.
Il est indispensable d’identifier les microorganismes suspects, notamment pour écarter
toute confusion avec les listeria qui peuvent donner des colonies similaires à celles des
entérocoques (Dellaras, 2007).