Partie II : Matériel et méthodes
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Figure N
o 10 : Technique d’ensemensement des entérocoques présumés dans le milieu de
Litsky.
II.2.3. La conservation des souches
Afin de bien préserver les souches pendant le mois d’Aout, deux techniques de
conservation ont été adoptées :
II.2.3.1. Conservation des souches sur Milieu BEA en gélose inclinée
A partir des cultures positives sur le milieu de Litsky les souches sont repiquées par stries
sur la gélose BEA inclinée. Après une incubation de 24 H à 37°C , les souches sont
conservées au réfrigirateur pendant un mois.
II.2.3.2.Conservation des souches sur milieu de Listky au glycérol
5 ml de culture sur bouillon de litsky sont additionnés 1 ml de glycerol. Les tubes sont
placés au congélateur pendant un mois. Au cours de la congélation l’eau cristallise et
forme des cristaux qui peuvent traumatiser les cellules bactériennes. Le glycérol est un
cryoprotecteur qui permet la multiplication de petits cristaux arrondis sous une forme de
cristallisation dite cubique. Ils sont peu agressifs pour les cellules bactériennes. Ainsi après
décongélation les cellules peuvent retrouver toute leur vitalité (Mazur, 1966, Accolas et
Auclair ,1967)
Milieu Rothe
DC +
Milieu Rothe
SC +
1 ml
1 ml
milieu Litsky
milieu Litsky
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Figure N
o 10 : Technique d’ensemensement des entérocoques présumés dans le milieu de
Litsky.
II.2.3. La conservation des souches
Afin de bien préserver les souches pendant le mois d’Aout, deux techniques de
conservation ont été adoptées :
II.2.3.1. Conservation des souches sur Milieu BEA en gélose inclinée
A partir des cultures positives sur le milieu de Litsky les souches sont repiquées par stries
sur la gélose BEA inclinée. Après une incubation de 24 H à 37°C , les souches sont
conservées au réfrigirateur pendant un mois.
II.2.3.2.Conservation des souches sur milieu de Listky au glycérol
5 ml de culture sur bouillon de litsky sont additionnés 1 ml de glycerol. Les tubes sont
placés au congélateur pendant un mois. Au cours de la congélation l’eau cristallise et
forme des cristaux qui peuvent traumatiser les cellules bactériennes. Le glycérol est un
cryoprotecteur qui permet la multiplication de petits cristaux arrondis sous une forme de
cristallisation dite cubique. Ils sont peu agressifs pour les cellules bactériennes. Ainsi après
décongélation les cellules peuvent retrouver toute leur vitalité (Mazur, 1966, Accolas et
Auclair ,1967)
Milieu Rothe
DC +
Milieu Rothe
SC +
1 ml
1 ml
milieu Litsky
milieu Litsky