Partie II : Matériel et méthodes
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II.3. Préparation de la solution mère et des dilutions
Toutes les manipulations ont été effectuées dans le respect des conditions d’hygiène et
d’asepsie.
Les morceaux de thon sont déposés sur un plateau stérile. A l’aide d’un scalpel, 25 g de
la chair sont prélèves. Le prélèvement s’effectué par grattage de toute la surface de
morceau du thon. La pesée se fait sur une balance de précision de marque AUHAS
.
Figure N
o
6 : Prélèvement de la chair fraîche du thon rouge (Thunnus thynnus)
Les 25g de la chair sont broyés dans un mortier et dans un mixeur stérile. Le broyat est
mis dans un erlen puis additionné de 225 ml d’eau peptonée stérile. Le mélange est
bien homogénéisé. Il constitue la solution mère ou la dilution 10
-1 . A partir de cette
dernière les dilutions 10
-2 à 10
-4 sont préparées.
A l’aide d’une micropipette, 1 ml de suspension mère est prélève et introduit dans un
tube contenant 9 ml d’eau peptonée stérile. Puis il est agité fortement à l’aide d’un
vortex, ainsi nous obtenons la dilution 10
-2
. L’opération est répétée jusqu’à l’obtention
de la dilution 10
-4 . (Voir Figure N
o 7).