Partie II : Matériel et méthodes
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Figure N
o 7 : Technique de préparation de la solution mère et des dilutions.
II.2. Recherche des entérocoques
Nous avons recherché la présence des entérocoques dans la chair de poisson,cette
recherche s’est faite d’abord sur les milieux de Rothe et de Litsky puis sur la gélose BEA
(gélose à la bile,à l’esculline et à l’azide de sodium). Elle s’est ensuite prolangée par leur
culture des souches sur des milieux hostiles.
II.2.1. Principe
La concentration en entérocoques est généralement peu élevée dans des produits
alimentaires, donc un enrichissement sur le milieu relativement sélectif, le milieu de Rothe
est nécessaire. Il est ensuite indispensable de confirmer que les bactéries ayant poussé en
présence d’azide sont des entérocoques G+. Leur croissance est ensuite testée en présence
de deux agents sélectifs associés, l’azide de sodium et l’éthyle-violet (ou violet
hexaméthylé) du milieu de Litsky (Joffin et Joffin, 2010).
II.2.1.1. Culture sur le milieu de Rothe
A). Principe
La recherche d’entérocoques est réalisée par la méthode d’enrichissement sur le milieu
Rothe qui constitue le test présomptif, (Anonyme 1).
L’azide de sodium inhibe la croissance des microorganismes à gram négatif par son action
bactériostatique et favorise la culture des entérocoques
mortier
solution mère
(10 -1 )
1 ml
1 ml
1 ml
dilution
10 -2
dilution
10 -3
dilution
10 -4
Preparation de la solution mére (10
-1 ) et des dilutions