Marine lipids
Estérification des acides gras extraits
à partir de lipides de poissons :
comparaison de deux méthodes
G. Stéphan, N. Conan
AFSSA Brest, technopôle Brest-lroise, BP 70, 29280 Plouzané, France
germaine.stephan@ifremer.fr
La détermination de la composition en acides gras des lipides des poissons d’élevage peut être un bon indicateur de letat sanitaire de la population mais permet aussi de caractériser la qualité nutritionnelle d’un
produit destiné à la consommation humaine. La chromatographie en
phase gazeuse est la méthode la plus appropriée pour déterminer la
composition quantitative et qualitative d’un mélange lipidique. Elle
nécessite au préalable la conversion des acides gras en esters méthyliques
plus volatils, afin d’améliorer la séparation des composés et la résolution
des pics. Les méthodologies décrites sont nombreuses. Le choix de celleci est conditionné par l’objectif analytique mais la rapidité et la consommation de réactifs sont également des critères déterminants.
Dans le présent travail deux méthodologies ont été comparées : une
méthode utilisée depuis très longtemps au laboratoire, dite « macrométhode », et une « microméthode » dont le protocole analytique est
comparable à celui décrit dans la publication de Morrison & Smith
(Journal of Lipid Research, 1964, 3, 600-608).
• La « macrométhode » est effectuée sur des teneurs en lipides supérieures
à 30 milligrammes. Cette méthode se décompose de la façon suivante :
- après extraction des lipides, la partie insaponifiable est séparée des acides
gras par saponification en présence de KOH 2M ; après libération des
acides gras par de l’acide chlorhydrique, ceux-ci sont méthylés en présence d’acide chlorhydrique comme catalyseur.
La teneur en acides gras et esters méthyliques, dans ce cas, est déterminée par gravimétrie.
• La « microméthode » est effectuée à partir de prise d’essai comprise
entre 20 mg et 1 milligramme. La teneur en esters méthyliques est
déterminée par étalonnage externe.
Le temps nécessaire pour obtenir une estérification complète des lipides,
avec un protocole expérimental identique à celui décrit par Morrison
& Smith, dépend non seulement de la teneur en lipides totaux mais également de la nature des lipides. Le temps de chauffage pour des prises
d’essai égales ou inférieures à 5 mg est au moins de 30 mn, quelle que
soit la nature des lipides, excepté pour les acides gras libres où l’estérification est complète à l’issue de 10 mn de chauffage. Le profil en acides
gras obtenu à l’aide des deux méthodes est alors comparable.
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Estérification des acides gras extraits
à partir de lipides de poissons :
comparaison de deux méthodes
G. Stéphan, N. Conan
AFSSA Brest, technopôle Brest-lroise, BP 70, 29280 Plouzané, France
germaine.stephan@ifremer.fr
La détermination de la composition en acides gras des lipides des poissons d’élevage peut être un bon indicateur de letat sanitaire de la population mais permet aussi de caractériser la qualité nutritionnelle d’un
produit destiné à la consommation humaine. La chromatographie en
phase gazeuse est la méthode la plus appropriée pour déterminer la
composition quantitative et qualitative d’un mélange lipidique. Elle
nécessite au préalable la conversion des acides gras en esters méthyliques
plus volatils, afin d’améliorer la séparation des composés et la résolution
des pics. Les méthodologies décrites sont nombreuses. Le choix de celleci est conditionné par l’objectif analytique mais la rapidité et la consommation de réactifs sont également des critères déterminants.
Dans le présent travail deux méthodologies ont été comparées : une
méthode utilisée depuis très longtemps au laboratoire, dite « macrométhode », et une « microméthode » dont le protocole analytique est
comparable à celui décrit dans la publication de Morrison & Smith
(Journal of Lipid Research, 1964, 3, 600-608).
• La « macrométhode » est effectuée sur des teneurs en lipides supérieures
à 30 milligrammes. Cette méthode se décompose de la façon suivante :
- après extraction des lipides, la partie insaponifiable est séparée des acides
gras par saponification en présence de KOH 2M ; après libération des
acides gras par de l’acide chlorhydrique, ceux-ci sont méthylés en présence d’acide chlorhydrique comme catalyseur.
La teneur en acides gras et esters méthyliques, dans ce cas, est déterminée par gravimétrie.
• La « microméthode » est effectuée à partir de prise d’essai comprise
entre 20 mg et 1 milligramme. La teneur en esters méthyliques est
déterminée par étalonnage externe.
Le temps nécessaire pour obtenir une estérification complète des lipides,
avec un protocole expérimental identique à celui décrit par Morrison
& Smith, dépend non seulement de la teneur en lipides totaux mais également de la nature des lipides. Le temps de chauffage pour des prises
d’essai égales ou inférieures à 5 mg est au moins de 30 mn, quelle que
soit la nature des lipides, excepté pour les acides gras libres où l’estérification est complète à l’issue de 10 mn de chauffage. Le profil en acides
gras obtenu à l’aide des deux méthodes est alors comparable.
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