Matériel et méthodes
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Tableau 4: Les concentrations critiques d’antibiotiques utilisées pour la sélection des
bactéries résistantes (CA-SFM, 2015).
Antibiotiques
Concentration μg/ml
Amoxicilline (AMX)
8
Céfotaxime (CTX)
2
Céftazidime (CAZ)
4
Imipénème (IMP)
8
Ciprofloxacine (CIP)
1
Gentamicine (GM)
4
Tétracycline (TE)
2
Le taux de bactéries résistantes a été déterminée par le rapport du nombre de bactéries
obtenues sur gélose Mac Conkey et Mueller Hinton additionnée d’antibiotique sur le
nombre de de coliformes totaux et de bactéries mésophiles aérobies totales obtenus sur
milieu sans antibiotique, respectivement (Miranda et Zemelman, 2001; Alouache et al.,
2012).
III.3. Identification des bactéries résistantes
Les souches ayant présenté une résistance aux antibiotiques AMX, CTX, CAZ, IMP, CIP,
GM et TE ont fait l’objet d’un ré-isolement sur une gélose Mueller-Hinton supplémenté de
l’antibiotique approprié afin de confirmer leur résistance, d’une identification par galeries
API 20E (Bio Mérieux) et d’une conservation en gélose de conservation en tube.
Le système API 20E d’identification des entérobactéries et autres bacilles à Gram négatif
comporte 20 tests biochimiques standardisés et miniaturisés.
Les milieux déshydratés sont reconstitués avec une suspension bactérienne préparée dans 5
ml d’eau physiologique (0.9% NaCl) à partir de 1 à 3 colonies pures d'une culture jeune
(18h). Les réactions produites pendant la durée d’incubation (24-48 h à 35 ± 2°C) se
traduisent par des virages colorés spontanés ou révélés par l’addition de réactifs. La
codification des réactions en un profil numérique permet, en se référant à un catalogue
analytique fourni par le fabriquant, de déterminer l’identification des souches bactériennes.
é
é
% =
é
é
∗
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Tableau 4: Les concentrations critiques d’antibiotiques utilisées pour la sélection des
bactéries résistantes (CA-SFM, 2015).
Antibiotiques
Concentration μg/ml
Amoxicilline (AMX)
8
Céfotaxime (CTX)
2
Céftazidime (CAZ)
4
Imipénème (IMP)
8
Ciprofloxacine (CIP)
1
Gentamicine (GM)
4
Tétracycline (TE)
2
Le taux de bactéries résistantes a été déterminée par le rapport du nombre de bactéries
obtenues sur gélose Mac Conkey et Mueller Hinton additionnée d’antibiotique sur le
nombre de de coliformes totaux et de bactéries mésophiles aérobies totales obtenus sur
milieu sans antibiotique, respectivement (Miranda et Zemelman, 2001; Alouache et al.,
2012).
III.3. Identification des bactéries résistantes
Les souches ayant présenté une résistance aux antibiotiques AMX, CTX, CAZ, IMP, CIP,
GM et TE ont fait l’objet d’un ré-isolement sur une gélose Mueller-Hinton supplémenté de
l’antibiotique approprié afin de confirmer leur résistance, d’une identification par galeries
API 20E (Bio Mérieux) et d’une conservation en gélose de conservation en tube.
Le système API 20E d’identification des entérobactéries et autres bacilles à Gram négatif
comporte 20 tests biochimiques standardisés et miniaturisés.
Les milieux déshydratés sont reconstitués avec une suspension bactérienne préparée dans 5
ml d’eau physiologique (0.9% NaCl) à partir de 1 à 3 colonies pures d'une culture jeune
(18h). Les réactions produites pendant la durée d’incubation (24-48 h à 35 ± 2°C) se
traduisent par des virages colorés spontanés ou révélés par l’addition de réactifs. La
codification des réactions en un profil numérique permet, en se référant à un catalogue
analytique fourni par le fabriquant, de déterminer l’identification des souches bactériennes.
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