Figure 18 : Dispositif de l’appareil de filtration sur membrane.
III.3.2.2. Protocole de travail.
La réalisation de cette technique a été faite selon le protocole suivant :
En présence du bec bunsen et sur une paillasse javellisée (Aichiou ; 2006
Modifié)
• Flamber la face supérieure (plaque poreuse) de l’appareil, fermer le robinet
du support et mettre en marche la pompe à vide.
• Prélever une membrane stérile en la saisissant par son bord extérieur, avec
une pince flambée et refroidie ; la déposer sur la plaque poreuse.
• L’entonnoir-réservoir flambé et refroidi est placé au-dessous de la
membrane.
• Placer l’entonnoir sur le support et le fixer fermement.
• Verser dans chaque entonnoir un volume 100ml d’échantillon bien
homogénéisé.
• Faire le vide jusqu’à filtration totale de l’échantillon.
• Retirer l’entonnoir et déposer la membrane filtrante à l’aide d’une pince
stérile sur un milieu adapté aux bactéries recherchées.
Tergitol 7 pour les Coliformes (Vert).
Slanetz et Bartley pour les Streptocoques (Jaune).
Figure 19 : Les deux milieux de culture pour les coliformes et streptocoques
respectivement.
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