accidentelle, correctement transporté au laboratoire et analysé après une
courte durée de conservation dans des conditions satisfaisantes (Maul ; 1997).
• Les échantillons sont prélevés dans des flacons de verre de 500 ml, stérilisés
au four à 170°C pendant une heure.
• Les flacons sont ouverts, remplis et refermés sous l’eau pour éviter toute
contamination avec l’air.
• Les échantillons sont transportés dans une glacière isotherme (4°C) à l’abri
de la lumière.
• Pour éviter les modifications de la teneur initiale, l’analyse ne doit pas
excéder 24 heures.
III.3.2. Le dénombrement bactérien.
La méthode de filtration sur membrane consiste à recueillir, sur une
membrane stérile un volume donné de produit à analyser (eau usée, eau de
consommation, et l’eau de mer), la membrane est ensuite déposée sur un milieu
nutritif convenable ; après incubation, les colonies sont dénombrer et identifier
(Champiat et al ; 1994).
III.3.2.1. Matériels.
• Bec-besen pour la stérilisation de la zone de travail.
• Boite Petri avec les milieux des cultures spécifiques pour chaque germe.
• Membranes d’ester de cellulose, filtrantes stériles quadrillées de porosité
de 0.45µm et de 49mm X 9mm de diamètre susceptible de retenir les
bactéries.
• Incubateur dont la température est ajustée selon le germe étudié.
• Pompe à vide.
• Pince stérilisée.
• Pipette.
• Milieux et réactifs : BEA (Bile et Esculine Azide), Kovacs ; eau peptonée
exempte d’indole (Voir annexe 3).
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