CHAPITRE II
Matériel et méthodes
30
-Les plaques sont plongées, en position verticale, dans une cuve contenant le système de solvant
méthanol/acétone (5 :2) à 1 cm du bord inférieur de la plaque (partie non imprégnée), puis la
cuve est fermée pour qu’elle se sature de vapeurs de solvants.
-La migration est arrêtée à 10 cm du bord supérieur (front du solvant).
Séparation des caroténoïdes sur couches non imprégnées
Réalisation
-Broyage de 5 g d’échantillon avec 10 ml d’éthanol.
-Filtration de la solution obtenue dans des ballons.
-Evaporation de l’éthanol avec le rotavapor.
-Récupération de l’extrait sec avec le système éthanol-acétone (9 : 1).
-Dépôt des échantillons dans des plaques chromatographiques sur une ligne de départ tracée à 2
cm du bord inférieur de la plaque.
-Plongement des plaques dans une cuve chromatographique contenant le système de solvant
Ether de pétrole /acétone (6 :4).
-Arrêt de la migration à 10 cm (front du solvant).
2.2.3. Incorporation des pigments dans l’aliment
2.2.3.1. Caractéristiques de l’aliment utilisé
Il s’agit d’un aliment commercial destiné aux poissons d’élevage de la marque« NatureAlleva »
qui provient d’Italie. C’est un aliment complet extrudé se présentant sous formes de granulés
fabriqué à partir de tourteau de farine de soja, de farine de poisson, de gluten de maïs, de féverole,
de tourteau de colza, d’huile de poisson, de blé, d’huile de colza, de chlorure de choline, de
lécithine, d’oligoéléments et d’antioxydants.
Un dosage des caroténoïdes sur l’échantillon d’aliment ainsi qu’une analyse spectrale par un
spectre UV-Visible ont été effectués suivant les mêmes protocoles utilisés précédemment pour
les algues. Le but était de déterminer la teneur de l’aliment commercial en caroténoïdes et
d’identifier les différents pigments déjà existant avant incorporation des nouveaux.
Matériel et méthodes
30
-Les plaques sont plongées, en position verticale, dans une cuve contenant le système de solvant
méthanol/acétone (5 :2) à 1 cm du bord inférieur de la plaque (partie non imprégnée), puis la
cuve est fermée pour qu’elle se sature de vapeurs de solvants.
-La migration est arrêtée à 10 cm du bord supérieur (front du solvant).
Séparation des caroténoïdes sur couches non imprégnées
Réalisation
-Broyage de 5 g d’échantillon avec 10 ml d’éthanol.
-Filtration de la solution obtenue dans des ballons.
-Evaporation de l’éthanol avec le rotavapor.
-Récupération de l’extrait sec avec le système éthanol-acétone (9 : 1).
-Dépôt des échantillons dans des plaques chromatographiques sur une ligne de départ tracée à 2
cm du bord inférieur de la plaque.
-Plongement des plaques dans une cuve chromatographique contenant le système de solvant
Ether de pétrole /acétone (6 :4).
-Arrêt de la migration à 10 cm (front du solvant).
2.2.3. Incorporation des pigments dans l’aliment
2.2.3.1. Caractéristiques de l’aliment utilisé
Il s’agit d’un aliment commercial destiné aux poissons d’élevage de la marque« NatureAlleva »
qui provient d’Italie. C’est un aliment complet extrudé se présentant sous formes de granulés
fabriqué à partir de tourteau de farine de soja, de farine de poisson, de gluten de maïs, de féverole,
de tourteau de colza, d’huile de poisson, de blé, d’huile de colza, de chlorure de choline, de
lécithine, d’oligoéléments et d’antioxydants.
Un dosage des caroténoïdes sur l’échantillon d’aliment ainsi qu’une analyse spectrale par un
spectre UV-Visible ont été effectués suivant les mêmes protocoles utilisés précédemment pour
les algues. Le but était de déterminer la teneur de l’aliment commercial en caroténoïdes et
d’identifier les différents pigments déjà existant avant incorporation des nouveaux.