Chapitre II
MATERIEL ET METHODES
30
Les souches fongiques filamenteuses répertoriées, lors de cette étude ont permis de constituer une
mycothèque à l’ENSSMAL.
II.9 Identification des micromycètes filamenteux
L’identification des champignons filamenteux est basée principalement sur l’observation des
caractères macroscopiques et microscopiques, Sans oublié l’analyse moléculaire qui est importante
voir indispensable.
II.9.1 Observation macroscopique
Elle se fait après la mise en culture des champignons, via l’œil nu ou la loupe binoculaire. On
observe les aspects de l’appareil végétatif tels que la couleur du recto et verso (blanche -vertenoire …), la taille, l’aspect (duveteux, filamenteux, peureux…), et le relief (plat, plissé..), aussi la
présence ou l’absence des pigments diffusant dans la gélose (Lecellier, 2013).
II.9.2 Observation microscopique
Elle se fait par l’utilisation d’un microscope optique, en se basant sur la structure de l’appareil
végétatif (hyphes septés ou non). Les organes de fructification (mode et type de formation des
spores) et les spores (aspect et type). (Lecellier, 2013).
II.10 Fermentation en milieu liquide
Des flacons de 250 ml contenant 100 ml du milieu de culture Czpeck dox liquide (Cz) et le YEPD
liquide, ont été inoculées avec 5 disques de 6mm d’une culture âgée de 7 jours puis incubés à 25°C,
pendant 14 jours (Tuomi et al., 2001 ) suivi d’une agitation vigoureuse quotidienne à l'aide d'un
agitateur magnétique.
Les jus de fermentation ont été soumis à plusieurs filtrations stérilisantes sur membrane de
filtration (0,45µm), afin d’évaluer leurs toxicités sur les nauplies d’Artemia.
Figure 19: A- Fermentation des souches fongiques B- Filtration des extraits fongiques
A
B
MATERIEL ET METHODES
30
Les souches fongiques filamenteuses répertoriées, lors de cette étude ont permis de constituer une
mycothèque à l’ENSSMAL.
II.9 Identification des micromycètes filamenteux
L’identification des champignons filamenteux est basée principalement sur l’observation des
caractères macroscopiques et microscopiques, Sans oublié l’analyse moléculaire qui est importante
voir indispensable.
II.9.1 Observation macroscopique
Elle se fait après la mise en culture des champignons, via l’œil nu ou la loupe binoculaire. On
observe les aspects de l’appareil végétatif tels que la couleur du recto et verso (blanche -vertenoire …), la taille, l’aspect (duveteux, filamenteux, peureux…), et le relief (plat, plissé..), aussi la
présence ou l’absence des pigments diffusant dans la gélose (Lecellier, 2013).
II.9.2 Observation microscopique
Elle se fait par l’utilisation d’un microscope optique, en se basant sur la structure de l’appareil
végétatif (hyphes septés ou non). Les organes de fructification (mode et type de formation des
spores) et les spores (aspect et type). (Lecellier, 2013).
II.10 Fermentation en milieu liquide
Des flacons de 250 ml contenant 100 ml du milieu de culture Czpeck dox liquide (Cz) et le YEPD
liquide, ont été inoculées avec 5 disques de 6mm d’une culture âgée de 7 jours puis incubés à 25°C,
pendant 14 jours (Tuomi et al., 2001 ) suivi d’une agitation vigoureuse quotidienne à l'aide d'un
agitateur magnétique.
Les jus de fermentation ont été soumis à plusieurs filtrations stérilisantes sur membrane de
filtration (0,45µm), afin d’évaluer leurs toxicités sur les nauplies d’Artemia.
Figure 19: A- Fermentation des souches fongiques B- Filtration des extraits fongiques
A
B