Chapitre II
MATERIEL ET METHODES
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Figure 18: Schéma représentatif de dénombrement et d’isolement des micromycètes.
II.7 Méthode monosporique OSMAC: One Strain Many Componds
Cette méthode se fait parallèlement avec la conservation des souches fongiques filamenteuses.
Une bouture de culture fongique était immergée au sein d'un tube d’Eppendorf contenant de l’eau
de mer stérile mélangé avec le tween 80, puis le contenant a été agité au vortex pendant quelques
minutes. À partir de ce mélange a servi à inoculer en 3 points équidistant des boîtes de pétri de
90mm coulées avec les milieux suivants : (MEA, CYA, PDA, GN25) et incubés pendant 7 jours à
25°C, une boîte de CYA supplémentaire a été incubé à 37°C.
Afin de déterminer la température optimale et les caractéristiques de croissance des souches
concernées ; un suivi quotidien de développements des souches a été fait pendant 7 jours ; les
diamètres des colonies ont été enregistrés. La texture de la colonie, le degré de sporulation, les
couleurs avers et invers des colonies, la production des pigments et des exsudats ont été notés.
II.8 Conservation
Le principe de la méthode de conservation des souches utilisées dans cette étude, est basé sur
l’émergence des boutures de culture fongique, au sein d’un tube Eppendorf contenant 1 ml d’eau de
mer stérile avec quelques gouttes de tween80. Les tubes Eppendorf sont fermés par du parafilm et
bien étiquetés. Ces derniers peuvent être conservés à 4°C ou même à température ambiante (37°C –
présente étude).
Dilutions décimales