Chapitre II :
Matériel et méthodes
42
Figure 16:Schéma illustratif de la recherche et dénombrement de Salmonelle sur gélose XLD.
IV.5.4. Confirmation biochimique
Marquer les colonies caractéristiques sur chaque boîte de pétri et choisir au moins une colonie
caractéristique ou typique pour la confirmation. Isoler les colonies sélectionnées et les
ensemencées sur la surface d’une la gélose nutritive coulée en boîte préalablement séchées, de
façon à permettre le développement de colonies bien isolées. Incuber les boîtes ensemencées
entre 34 °C et 38 °C pendant 24 h ± 3 h.
Pour la confirmation biochimique en utilisant une galerie d’identification miniaturisées, la
galerie API 20 E (analytical profile index, 20 caractères pour les entérobactéries) est une
galerie miniaturisée et standardisée de tests biochimiques, elle est composée des milieux
déshydratés ayant des compositions chimiquement définies pour chaque test.
Ils détectent généralement une activité enzymatique, principalement liée à la fermentation des
glucides ou au catabolisme des protéines ou des acides aminés par les organismes inoculés.
Avant l’ensemencement de la galerie, on procède à réunir le fond et le couvercle d’une boîte
d’incubation et répartir environ 5 ml d'eau distillée dans les alvéoles pour créer une
atmosphère humide. Puis déposer stérilement la galerie dans la boîte d’incubation et inscrire
la référence de la souche sur la languette latérale de la boîte.
Prenez une seule colonie isolée dans la gélose nutritive et faites une suspension bactérienne
dans de l'eau distillée stérile (0,5 McFarlane) est ensemencée sur la galerie API 20 E suivant
cette démarche :
Matériel et méthodes
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Figure 16:Schéma illustratif de la recherche et dénombrement de Salmonelle sur gélose XLD.
IV.5.4. Confirmation biochimique
Marquer les colonies caractéristiques sur chaque boîte de pétri et choisir au moins une colonie
caractéristique ou typique pour la confirmation. Isoler les colonies sélectionnées et les
ensemencées sur la surface d’une la gélose nutritive coulée en boîte préalablement séchées, de
façon à permettre le développement de colonies bien isolées. Incuber les boîtes ensemencées
entre 34 °C et 38 °C pendant 24 h ± 3 h.
Pour la confirmation biochimique en utilisant une galerie d’identification miniaturisées, la
galerie API 20 E (analytical profile index, 20 caractères pour les entérobactéries) est une
galerie miniaturisée et standardisée de tests biochimiques, elle est composée des milieux
déshydratés ayant des compositions chimiquement définies pour chaque test.
Ils détectent généralement une activité enzymatique, principalement liée à la fermentation des
glucides ou au catabolisme des protéines ou des acides aminés par les organismes inoculés.
Avant l’ensemencement de la galerie, on procède à réunir le fond et le couvercle d’une boîte
d’incubation et répartir environ 5 ml d'eau distillée dans les alvéoles pour créer une
atmosphère humide. Puis déposer stérilement la galerie dans la boîte d’incubation et inscrire
la référence de la souche sur la languette latérale de la boîte.
Prenez une seule colonie isolée dans la gélose nutritive et faites une suspension bactérienne
dans de l'eau distillée stérile (0,5 McFarlane) est ensemencée sur la galerie API 20 E suivant
cette démarche :