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Chapitre 02 : matériels et méthodes
III.2. Dosage Des Composés Phénoliques
III.2.1. Préparation De La Gamme D’étalonnage Pour Les Différents Dosages
La quantification des polyphénols totaux et des flavonoïdes totaux se réfère à des courbes
d’étalonnage préparées par le standard convenable à chaque test. Une série de dilutions (2 - 45 mg/l)
de standards a été effectuée à partir d’une solution mère (0.2mg/ml). Le tableau II.1 représente les
différents standards utilisés pour chaque test et les concentrations retenues pour tracer les différentes
courbes d’étalonnage.
Tableau II.1. Standards et concentrations utilisés pour la préparation des courbes d’étalonnage pour
les différents tests.
Test
Standard
Concentration (mg/l)
Polyphénols Totaux
Acide Gallique
2 - 45
Flavonoïdes Totaux
Quercetine Pure
2- 45
 Préparation D'acide Gallique
Pour préparer la solution d'acide gallique on prend 2mg d'Acide Gallique + 10 ml éthanol.
 La Gamme d’étalonnage
On dilue la solution standardisée d'acide Gallique de manière à avoir les Concentrations suivante :
45/40/36/32/28/24/20/16/12/8/6/4/2/0 mg/l
 On prend 0.5ml de chacune de ces solutions dans 5ml d'eau distillé ;
 On ajoute 1ml de Réactif de Folin Cicalteau dilué 10 fois (1ml de Folin /9ml d’eau) et
on laisse reposer 1min .
 On ajoute ensuite 0.8 ml de la solution saturée de Na2CO3 à 7.5% (7.5 g /100 ml) ;
 La couleur bleue commence à apparaître après un laps de Temps ;
 On mesure l’absorbance de ces solutions avec un spectrophotomètre UV à 765nm.