Matériel et Méthodes
30
Remarque : La confirmation de la présence des Staphylocoques à coagulase+, nécessite la
détermination de la thermo-nucléase.
La stérilisation du matériel utilisé se fait par autoclavage à 121 c° pendant 20 min
Prélèvement pour l’analyse :
Cette étape consiste à prélever de manière aseptique une fraction de la chair des poissons
choisis jusqu'à l’obtention d’un poids de 25g destinée à la préparation de la solution mère (la
pesée se fait avec une balance de précision) .
Broyage de la chair et préparation de la solution mère :
On prélève 25 g de chair de chaque poisson à l'aide de pinces stériles à proximité du bec
bunsen allumé.
La chair est ensuite déposée dans le réservoir homogénéisateur.
La dilution de l'échantillon se fait en additionnant 225 ml de l'eau physiologique stérile
(Tableau 2.4), et à l'aide d'un mixeur stérile et inoxydable, l’ensemble sera correctement
broyé (Figure 2.7).
Nous obtiendrons alors 250 ml d'une solution homogénéisée.
La solution obtenue appelée solution mère est laissée au repos pendant 30 minutes pour
assurer la revivification des germes stressés par homogénéisation. La dilution de cette
solution est de concentration de10
-1 .
Tableau 2.4 : Composition de l’eau physiologique.
Diluant
Composition
Eau physiologique
NaCl
9 g
Eau Distillée
1000 ml
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Remarque : La confirmation de la présence des Staphylocoques à coagulase+, nécessite la
détermination de la thermo-nucléase.
La stérilisation du matériel utilisé se fait par autoclavage à 121 c° pendant 20 min
Prélèvement pour l’analyse :
Cette étape consiste à prélever de manière aseptique une fraction de la chair des poissons
choisis jusqu'à l’obtention d’un poids de 25g destinée à la préparation de la solution mère (la
pesée se fait avec une balance de précision) .
Broyage de la chair et préparation de la solution mère :
On prélève 25 g de chair de chaque poisson à l'aide de pinces stériles à proximité du bec
bunsen allumé.
La chair est ensuite déposée dans le réservoir homogénéisateur.
La dilution de l'échantillon se fait en additionnant 225 ml de l'eau physiologique stérile
(Tableau 2.4), et à l'aide d'un mixeur stérile et inoxydable, l’ensemble sera correctement
broyé (Figure 2.7).
Nous obtiendrons alors 250 ml d'une solution homogénéisée.
La solution obtenue appelée solution mère est laissée au repos pendant 30 minutes pour
assurer la revivification des germes stressés par homogénéisation. La dilution de cette
solution est de concentration de10
-1 .
Tableau 2.4 : Composition de l’eau physiologique.
Diluant
Composition
Eau physiologique
NaCl
9 g
Eau Distillée
1000 ml