Chapitre 2
Matériel et méthodes
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L’observation microscopique est réalisée sous microscope à l’objectif à immersion (100 x
avec ajout de l’huile de paraffine). La coloration en violet et les forme Cocci indiquent les
bactéries à Gram
+ , tandis que la couleur rose et la forme bacille est typique des bactéries à
Gram
- (Figure 5).
Figure 5 : Résultat de coloration de Gram
II.2.6.2. Test de l’oxydase
A l’aide d’une pince, on place un disque oxydase sur une lame porte objet et l’imbiber avec
une goutte d’eau distillée.
Prélever une partie d’une colonie, bien isolée et représentative de la culture fraiche à tester, à
l’aide d’une pipette pasteur boutonnée stérile et l’étaler sur le disque d’oxydase.
La réaction positive donne une coloration bleu foncé à violet apparaissant dans un délai de 30
secondes (indique que la bactérie est oxydase positive), alors que la réaction négative se
traduit par l’absence de coloration ou coloration au-delà de 30 secondes.
Figure 6 : Résultat du test oxydase
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