Chapitre 2
Matériel et méthodes
19
II.2.2. La flore mésophile aérobie total à 30°C
Le dénombrement de la flore mésophile aérobie totale reste la meilleure méthode pour évaluer
la qualité microbiologie des aliments (Marchal et al, 1991).
II.2.2.1. Mode opératoire
On prélève 1 ml de chaque dilution (10
-1 , 10
-2 ,10
-3 ,10
-4 ,10
-5 ) et le met aseptiquement dans des
boites de pétri vide. On y ajoute 10 à 15 ml de milieu PCA (Plate Count Agar) en surfusion
(45°C).
Le mélange est homogénéisé par des mouvements horizontaux et circulaires des boites
(mouvement de 8). Les boites de Pétri sont incubées à 30°C et le comptage des colonies se
fait après 24h à 48h d’incubation.
II.2.2.2. Lecture
Le dénombrement se fait dans les boites qui contiennent au moins 30 et au plus 300 colonies
de forme lenticulaire. Le résultat est exprimé comme suit :
𝑁 =
∑colonies
V∗(n1+0,1n2)∗d1
….. (1)
Avec :
 N : nombre d’UFC par gramme ou par ml de produit initial.
 Σ : somme des colonies des boites interprétables.
 V : volume de solution déposé (1ml).
 n1 : nombre de boites considérées à la première dilution retenue.
 n2 : nombre de boites considérées à la seconde dilution retenue.
 d1 : facteur de la première dilution retenue.
Selon le journal officiel de la république algérienne, la norme à respecter des FMAT ne doit
pas dépasser 10
6 à 10
7 UFC/g.
II.2.3. Recherche et dénombrement des coliformes thermotolérants
II.2.3.1. Mode opératoire
A l’aide d’une pipette pasteur stérile, on prélève 0,1 ml de chaque dilution sur des boites de
pétri contenants le milieu Tergitol, puis on a étalé soigneusement l’inoculum sur la surface
gélosée de chaque boite avec un râteau stérile (préparée à l’aide d’une pipette pasteur).
L’incubation a été réalisée à 44°C pendant 24h.