CHAPITRE II : Matériels et méthodes
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II.3.3.1.1. Le screening phytochimique des flavonoïdes :
a) Test de bate-smith (test de flavan3, 4diols):
Pour réaliser ce test 2 ml de l’extrait hydro-alcoolique (A) sont mélangés avec 0,5 ml de HCl
concentré, puis porter au bain marie pendant 30 minutes. L’apparition d’une coloration rouge
dénote la présence de Leucoanthocyanes qui sont des dérivés des flavan-3,4-diols.
b) Test de Wilstater (test de flavonols et flavanones) :
2,5 ml de l’extrait hydro-alcoolique (A) sont fusionnés avec 0,5 ml de l’HCl concentré. On
ajoute tout doucement quelques fragments de magnésium et on laisse agir sous la hotte.
L’apparition d’une couleur qui vire vers le rouge pourpre (Flavonols) ou le rouge violacées
(Flavonones et Flavonols) confirme l’existence des flavonoïdes.
II.3.3.1.2. Le screening phytochimique des Tannins :
Pour la détection des deux différents types de tannins, deux différents tests sont utilisés :
Les tannins catéchiques sont identifiés par ajout de gélatine à 1%. 4 a 5 gouttes de gélatine ont
été ajoutées aux extraits, le mélange a été maintenu au vortex pendant quelques secondes. La
couleur vire au brun verdâtre en présence de tannins catéchiques avec précipitation.
Les tannins galliques sont identifiés par ajout de FeCl3. En effet, nous avons filtré 5 ml de
chaque extrait aqueux. Le filtrat est recueilli et saturé par l’acétate de sodium. L’addition de a 5
gouttes de FeCl3 provoque l’apparition d’une coloration bleu-noir intense dénotant la présence
de tanins galliques.
II.3.3.1.3. Le screening phytochimique des Quinones :
Pour mettre en évidence les Quinones, nous avons utilisé le NaOH à 10%. En effet, 2 ml de
l’extrait (E) ont été mélangés avec un volume de 1ml de NaOH, Après agitation, l’apparition
d’une coloration qui vire au jaune, rouge ou violet de la phase aqueuse confirme la présence des
quinones.
II.3.3.1.4. Le screening phytochimique des coumarines :
Pour cela, un fragment de l’extrait (E) est dissout dans 2 ml d’eau chaude et après
refroidissement La solution est mélangée avec 0,5 ml d’ammoniaque (25 %NH4OH)
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II.3.3.1.1. Le screening phytochimique des flavonoïdes :
a) Test de bate-smith (test de flavan3, 4diols):
Pour réaliser ce test 2 ml de l’extrait hydro-alcoolique (A) sont mélangés avec 0,5 ml de HCl
concentré, puis porter au bain marie pendant 30 minutes. L’apparition d’une coloration rouge
dénote la présence de Leucoanthocyanes qui sont des dérivés des flavan-3,4-diols.
b) Test de Wilstater (test de flavonols et flavanones) :
2,5 ml de l’extrait hydro-alcoolique (A) sont fusionnés avec 0,5 ml de l’HCl concentré. On
ajoute tout doucement quelques fragments de magnésium et on laisse agir sous la hotte.
L’apparition d’une couleur qui vire vers le rouge pourpre (Flavonols) ou le rouge violacées
(Flavonones et Flavonols) confirme l’existence des flavonoïdes.
II.3.3.1.2. Le screening phytochimique des Tannins :
Pour la détection des deux différents types de tannins, deux différents tests sont utilisés :
Les tannins catéchiques sont identifiés par ajout de gélatine à 1%. 4 a 5 gouttes de gélatine ont
été ajoutées aux extraits, le mélange a été maintenu au vortex pendant quelques secondes. La
couleur vire au brun verdâtre en présence de tannins catéchiques avec précipitation.
Les tannins galliques sont identifiés par ajout de FeCl3. En effet, nous avons filtré 5 ml de
chaque extrait aqueux. Le filtrat est recueilli et saturé par l’acétate de sodium. L’addition de a 5
gouttes de FeCl3 provoque l’apparition d’une coloration bleu-noir intense dénotant la présence
de tanins galliques.
II.3.3.1.3. Le screening phytochimique des Quinones :
Pour mettre en évidence les Quinones, nous avons utilisé le NaOH à 10%. En effet, 2 ml de
l’extrait (E) ont été mélangés avec un volume de 1ml de NaOH, Après agitation, l’apparition
d’une coloration qui vire au jaune, rouge ou violet de la phase aqueuse confirme la présence des
quinones.
II.3.3.1.4. Le screening phytochimique des coumarines :
Pour cela, un fragment de l’extrait (E) est dissout dans 2 ml d’eau chaude et après
refroidissement La solution est mélangée avec 0,5 ml d’ammoniaque (25 %NH4OH)