Enzymes plasmatiques__________________________________251
3.3.3. Détermination de l'activité enzymatique de la lactate déshydrogénase
Nous avons déjà vu plusieurs fois cette réaction qui est souvent couplée à
d'autres pour déterminer les activités d'autres enzymes.
Ici la réaction est directe :
T DH
Pyruvate + NADH.H-^ <————> L-lactate + NAD+
La vitesse initiale d'oxydation du NADH est proportionnelle à l'activité catalytique de la LDH. Elle est déterminée par mesure de la diminution d'absorbance à 340 nm.
3.4. Isoenzymes des LDH
La lactate déshydrogénase sérique possède cinq variétés d'isoenzymes différentes qui peuvent être séparées par électrophorèse du sérum sur acétate de cellulose.
Ces isoenzymes résultent de l'association quatre par quatre de deux types de
protomères (A et B).
LDH, = 84
LDH^ = A^
LDH3 = A^
LDH4=Â3Bi
LDHg = A4.
Chaque isoenzyme a un poids moléculaire voisin de 140 000 Da et chaque
monomère un poids moléculaire de 35 000 Da.
3.4.1. Étude électrophorétique globale
À l'électrophorèse les 5 isoenzymes sont séparées suivant leur vitesse de
migration en LDH,, LDH^, LDHg, LDîî^ et LDH:5. La LDH, est la plus rapide.
La répartition de ces isoenzymes varie selon les tissus. La LDH, prédomine dans le cœur alors que la LDHc prédomine dans le foie et dans les muscles
squelettiques.
L'évaluation quantitative de chaque variété d'isoenzymes est intéressante en
clinique, car l'atteinte d'un organe entraînera le passage dans le sérum du type
d'isoenzyme qu'il contient.
Les pourcentages de chacun des isoenzymes de LDH observés dans le sérum
humain sont les suivants :
LDH, = 20 %
LDH;, = 40 %
LDH3 = 20 %
LDH4 = 10 %
LDHs = 10 %.
3.3.3. Détermination de l'activité enzymatique de la lactate déshydrogénase
Nous avons déjà vu plusieurs fois cette réaction qui est souvent couplée à
d'autres pour déterminer les activités d'autres enzymes.
Ici la réaction est directe :
T DH
Pyruvate + NADH.H-^ <————> L-lactate + NAD+
La vitesse initiale d'oxydation du NADH est proportionnelle à l'activité catalytique de la LDH. Elle est déterminée par mesure de la diminution d'absorbance à 340 nm.
3.4. Isoenzymes des LDH
La lactate déshydrogénase sérique possède cinq variétés d'isoenzymes différentes qui peuvent être séparées par électrophorèse du sérum sur acétate de cellulose.
Ces isoenzymes résultent de l'association quatre par quatre de deux types de
protomères (A et B).
LDH, = 84
LDH^ = A^
LDH3 = A^
LDH4=Â3Bi
LDHg = A4.
Chaque isoenzyme a un poids moléculaire voisin de 140 000 Da et chaque
monomère un poids moléculaire de 35 000 Da.
3.4.1. Étude électrophorétique globale
À l'électrophorèse les 5 isoenzymes sont séparées suivant leur vitesse de
migration en LDH,, LDH^, LDHg, LDîî^ et LDH:5. La LDH, est la plus rapide.
La répartition de ces isoenzymes varie selon les tissus. La LDH, prédomine dans le cœur alors que la LDHc prédomine dans le foie et dans les muscles
squelettiques.
L'évaluation quantitative de chaque variété d'isoenzymes est intéressante en
clinique, car l'atteinte d'un organe entraînera le passage dans le sérum du type
d'isoenzyme qu'il contient.
Les pourcentages de chacun des isoenzymes de LDH observés dans le sérum
humain sont les suivants :
LDH, = 20 %
LDH;, = 40 %
LDH3 = 20 %
LDH4 = 10 %
LDHs = 10 %.