Protéines plasmatiques__________________________________231
Élimination
du sérum
Réaction colorimétrique
Substrat
-<
A8>.___ Chromogène
j——^(?"^ (ABTS®)
Produit coloré
Figure 9.72 • Schéma réactionnel d'une technique enzymoimmunologique selon le
principe « sandwich » (note d'information scientifique. Roche-Boehringer).
En phase hétérogène, les méthodes sont identiques aux précédentes.
Les différents marqueurs fluorescents ou fluorochromes sont :
- l'isothiocyanate de fluorescéine ;
- les rhodamines ;
- les complexes à base de lanthanides (europium ou terbium) qui ont une
bande d'émission étroite, un indice de Stokes (différence entre la longueur
d'onde d'excitation et celle d'émission) élevé et enfin une durée de vie d'émission longue de l'ordre de 50 à 1 000 [is, ce qui permet d'éviter les interférences
dues au milieu biologique ;
- les substrats enzymatiques fluorescents où la fluorescence n'est révélée
qu'après hydrolyse enzymatique du composé marqué.