228____________________________________Biochimie clinique
La plupart des automates de biochimie sont donc capables d'effectuer ces
mesures.
- La néphélémétrie évalue la diffusion de la lumière sur les particules du
milieu trouble, qui dépend de la taille des particules, de leur indice de réfraction,
de la longueur d'onde de la radiation incidente, émise ou non par un laser. La
lumière diffusée est mesurée dans une direction différente de celle de la lumière
incidente, avec un angle variable suivant les appareils du commerce.
4.1.1.2. Diffusion en gel
L'immunodiffusion simple peut être linéaire (Oudin) ou radiale (Mancini).
Dans l'immunodiffusion radiale, le diamètre de l'anneau de précipitation est
proportionnel à la concentration de l'antigène et cette technique a été très populaire.
Immunodiffusion en gel après électrophorèse.
U s'agit des techniques d'immunoélectrophorèse, simple ou bidimensionnelle, de l'électro-immunodiffusion selon Laurell ou encore de l'immunofixation. Toutes ces techniques associent un temps électrophorétique à une précipitation immunologique secondaire par diffusion ou simultanée dans la méthode
de Laurell.
Celle-ci, en effet, réalise la migration électrophorétique dans une gélose
imprégnée d'anticorps, entraînant la formation de pics ou « rockets » dont la
hauteur, est proportionnelle à la concentration de l'antigène soumis à l'électrophorèse.
4.1.2. Méthodes d'agglutination
Ces méthodes sont souvent anciennes et sont très variées.
Elles consistent à revêtir une particule (hématie, grain de latex, micro-organismes) d'un antigène unique ou d'un complexe antigénique ou d'un anticorps
et à observer l'agglutination produite par un réactif agglutinant lui-même très
variable : anticorps, anticorps associé au complément, complément, antigène.
L'observation de l'agglutination peut être visuelle, photométrique ou par
comptage de particules.
Un exemple typique de ces réactions est donné par les techniques de détermination des groupes sanguins.
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