Métabolisme des lipides et des lipoprotéines______________________171
3.3. Paramètres lipidiques
?
3.3.1. Aspect du sérum
Sur un sujet à jeun depuis 12 heures, le sérum doit être clair, c'est-à-dire avec
un faible taux de VLDL et sans chylomicron. S'il est opalescent, il y a un excès
de VLDL ; s'il est lactescent, des chylomicrons sont présents. Pour contrôler la
présence effective de chylomicrons, le sérum est conservé 24 heures à + 4 °C et
les chylomicrons forment alors une crème à la surface du sérum.
1 3.3.2. Dosage des triglycérides
Des techniques enzymatiques sont utilisées par plus de 90 % des laboratoires.
Elles reposent sur le dosage enzymatique du glycérol libéré après action de
la lipase. Le glycérol libre préexistant est en quantité très faible dans le sérum.
On peut cependant le doser sans faire l'hydrolyse préalable des triglycérides.
La première étape est une phosphorylation du glycérol par la glycérol kinase.
Selon les étapes suivantes il s'agit de dosage photométrique dans le visible ou
dans l'U.V.
3.3.2.1. Dosage enzymatique calorimétrique
3.3.2.2. Dosage enzymatique à l'oxydase-peroxydase
La lecture colorimétrique est effectuée à 500 nm. La coloration due au Formazan est proportionnelle à la concentration en triglycérides dans le sérum.
Cette première technique enzymatique colorimétrique est en voie d'abandon.
3.3. Paramètres lipidiques
?
3.3.1. Aspect du sérum
Sur un sujet à jeun depuis 12 heures, le sérum doit être clair, c'est-à-dire avec
un faible taux de VLDL et sans chylomicron. S'il est opalescent, il y a un excès
de VLDL ; s'il est lactescent, des chylomicrons sont présents. Pour contrôler la
présence effective de chylomicrons, le sérum est conservé 24 heures à + 4 °C et
les chylomicrons forment alors une crème à la surface du sérum.
1 3.3.2. Dosage des triglycérides
Des techniques enzymatiques sont utilisées par plus de 90 % des laboratoires.
Elles reposent sur le dosage enzymatique du glycérol libéré après action de
la lipase. Le glycérol libre préexistant est en quantité très faible dans le sérum.
On peut cependant le doser sans faire l'hydrolyse préalable des triglycérides.
La première étape est une phosphorylation du glycérol par la glycérol kinase.
Selon les étapes suivantes il s'agit de dosage photométrique dans le visible ou
dans l'U.V.
3.3.2.1. Dosage enzymatique calorimétrique
3.3.2.2. Dosage enzymatique à l'oxydase-peroxydase
La lecture colorimétrique est effectuée à 500 nm. La coloration due au Formazan est proportionnelle à la concentration en triglycérides dans le sérum.
Cette première technique enzymatique colorimétrique est en voie d'abandon.