172__________________________________Biochimie clinique
La lecture colorimétrique est effectuée à 540 nm.
Cette technique est la plus utilisée actuellement (2/3 des laboratoires français
la pratiquent).
3.3.2.3. Dosage enzymatique par spectroréflectométrie
II s'agit d'un dosage utilisant le même principe de reaction que le dosage
enzymatique à l'oxydase-peroxydase mais pratiqué sur support solide.
Taux normaux homme < 7,5 mmol/l ou < 1,30 g/l
Taux normaux femme < 1,3 mmol/l ou < 1,15 g/l
Pour établir un régime et/ou un traitement le seuil pathologique sera égal ou
supérieur à 2,3 mmol/l soit 2 g/l.
3.3.3. Dosage du cholestérol
Le cholestérol peut être dosé par de très nombreuses méthodes. Les plus
anciennes sont colorimétriques, les plus pratiquées sont enzymatiques. La
méthode de référence est chromatographique.
3.3.3.1. Méthodes enzymatiques
Ces méthodes concernent plus de 99 % des laboratoires français. Elles utilisent toutes une cholestérol estérase et une cholestérol oxydase.
Dans une première étape les esters de cholestérol sont hydrolyses en cholestérol libre par l'estérase puis le cholestérol libre est oxydé en A4-cholesténone
avec production d'eau oxygénée.
Les diverses techniques enzymatiques diffèrent entre elles par le dosage de
cette eau oxygénée.
Cholestérol
0,, Cholestérol oxydase
CE ———;———> CL + AG CL —
y ————————-——> cholestène-4, one 3
estérase
-- -
(CE = Cholestérol estérifié)
(CL = Cholestérol libre)
H^O^ formée peut être dosée en présence de catalase ou peroxydase :
La lecture colorimétrique est effectuée à 540 nm.
Cette technique est la plus utilisée actuellement (2/3 des laboratoires français
la pratiquent).
3.3.2.3. Dosage enzymatique par spectroréflectométrie
II s'agit d'un dosage utilisant le même principe de reaction que le dosage
enzymatique à l'oxydase-peroxydase mais pratiqué sur support solide.
Taux normaux homme < 7,5 mmol/l ou < 1,30 g/l
Taux normaux femme < 1,3 mmol/l ou < 1,15 g/l
Pour établir un régime et/ou un traitement le seuil pathologique sera égal ou
supérieur à 2,3 mmol/l soit 2 g/l.
3.3.3. Dosage du cholestérol
Le cholestérol peut être dosé par de très nombreuses méthodes. Les plus
anciennes sont colorimétriques, les plus pratiquées sont enzymatiques. La
méthode de référence est chromatographique.
3.3.3.1. Méthodes enzymatiques
Ces méthodes concernent plus de 99 % des laboratoires français. Elles utilisent toutes une cholestérol estérase et une cholestérol oxydase.
Dans une première étape les esters de cholestérol sont hydrolyses en cholestérol libre par l'estérase puis le cholestérol libre est oxydé en A4-cholesténone
avec production d'eau oxygénée.
Les diverses techniques enzymatiques diffèrent entre elles par le dosage de
cette eau oxygénée.
Cholestérol
0,, Cholestérol oxydase
CE ———;———> CL + AG CL —
y ————————-——> cholestène-4, one 3
estérase
-- -
(CE = Cholestérol estérifié)
(CL = Cholestérol libre)
H^O^ formée peut être dosée en présence de catalase ou peroxydase :