278
CINÉTIQUE ENZYMATIQUE
intermédiaire dans laquelle VV ≈ ˜ . Il s’ensuit que le graphique de log V en fonction
du pH devrait avoir la forme présentée dans la partie supérieure de la figure 8.9,
correspondant approximativement à trois segments linéaires se coupant à
pH = pK EA1 et pH = pK EA2 . Le comportement de VK m présenté dans la partie
centrale de la figure 8.9 est similaire, excepté que les intersections sont localisées à
pH = pK E1 et à pH = pK E2 . En dépit de la complexité de l’équation [8.18], le
graphique de log K m en fonction du pH s’obtient simplement par soustraction, et sa
forme est représentée dans la partie inférieure de la même figure 8.9.
pH
pH
pH
log(V/K m )
logV
pK EA1
pK EA2
pK EA1
pK EA2
pK E1
pK E2
pK E1
pK E2
log(K m )
a
b
c
8.9 - Interprétation des profils de pH en accord avec la théorie de DIXON (1953a)
Bien que les graphiques du logarithme de n’importe lequel des paramètres cinétiques donne
toujours des courbes lisses, comme le montre les courbes en pointillés, elles peuvent être
utilement interprétées comme si elles étaient constituées de segments de droites.
(a) Des variations de la pente du graphique de log V en fonction du pH reflètent des ionisations dans le complexe enzyme-substrat ; (b) des variations de la pente du graphique de
log (V /K m ) en fonction du pH reflètent des ionisations dans l’enzyme libre ; (c) en principe
toutes les ionisations affectent K m d’une manière qui est le plus facilement rationalisée en
considérant le graphique de log Km comme le graphique de log V – log( V /K m ).