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CINÉTIQUE ENZYMATIQUE
d'intersection commun situé sur l'axe [] Bv , c'est-à-dire pour [] B = 0. Les
graphiques primaires de [] Av en fonction de [] A sont linéaires, sans point
d'intersection, mais les droites de chaque paire se coupent à une valeur positive de
[] A , c'est-à-dire à droite de l'axe [] Av . Ces graphiques sont illustrés dans la
figure 6.17.
0,5
1
10
2
5
[A]
[A]
0
[A]/v
5
[B]
[B]
0
[B]/v
0,5
1
10
2
6.17 - Effet de l'inhibition par le substrat (avec K siB = 10K mB ) sur les graphiques
primaires pour les mécanismes à enzyme modifié
6.6.5. Valeur diagnostique de l'inhibition par le substrat
L'inhibition par le substrat peut à première vue apparaître comme une complication
inutile dans l'analyse des données cinétiques. En réalité, elle est très informative,
puisqu'elle accentue la différence de comportement prédite entre les mécanismes à
complexe ternaire et les mécanismes à enzyme modifié et qu'elle est généralement
simple à interpréter. Comme, en principe, un substrat se fixe plus fortement à la
bonne forme de l'enzyme qu'à la mauvaise, l'inhibition par le substrat est rarement
suffisamment importante pour perturber l'analyse décrite dans le § 6.5. L'inhibition
par un substrat obtenue pour une concentration faible de l'autre substrat fournit une
preuve positive de l'existence d'un mécanisme à enzyme modifié. Par contre,
l'observation d'une valeur de VK
app
m
app qui soit indépendante de la concentration
de l'autre substrat (éq. [6.37]) ne constitue qu'un argument négatif pour l'existence
d'un mécanisme à enzyme modifié, puisqu'un tel comportement est également
observé dans un cas spécial de mécanisme séquentiel où la variation attendue
VK
app
m
app n'est pas détectée.
Dans un mécanisme ordonné à complexe ternaire, l'inhibition par le substrat permet
d'identifier le substrat qui se fixe en second sans avoir recours à des études
d'inhibition par le produit.