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CINÉTIQUE ENZYMATIQUE
ceux faits à la fin du paragraphe 5.6.3. Le point essentiel consiste à inclure des
valeurs de [I] qui soient suffisamment élevées et nombreuses pour déterminer si la
vitesse tend ou non vers zéro lorsque la concentration d’inhibiteur approche de la
saturation.
Tableau 5.3 - Préparation des expériences d’inhibition
[I] 1+
[] I
K ic
1+
[] I
K iu
K m
app
Valeurs de [A]
0
0,5
1
2
5
10
20
1,0
1,25
1,5
2,0
3,5
6,0
11,0
1,0
1,05
1,1
1,2
1,5
2,0
3,0
1,0
1,2
1,4
1,7
2,3
3,0
3,7
0,2
0,2
0,2
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
1
1
1
1
1
1
1
2
2
2
2
2
2
2
5
5
5
5
5
5
5
10
10
10
10
10
20
20
20
20
50
Le tableau représente le choix de concentrations de substrat [A] nécessaire pour
déterminer les constantes d’inhibition K ic et K iu dans une expérience où les valeurs
approximatives sont les suivantes : K m = 1, K ic = 2 et K iu = 10, en unités arbitraires (bien que
les unités pour K iu et K ic sont les mêmes). Les valeurs suggérées pour [A] sont exprimées
dans les mêmes unités que K m , et sont choisies pour s’étaler d’environ 0,2 K m
app jusqu’à
environ 10 K m
app pour chaque valeur de la concentration d’inhibiteur [ I ].
5.8. EFFETS INHIBITEURS DES SUBSTRATS
5.8.1. Fixation non-productive
La majorité des informations dont nous disposons sur les propriétés générales des
enzymes a été obtenue par l’étude d’un petit groupe d’enzymes, les enzymes
extracellulaires catalysant des réactions d’hydrolyse, qui comprend la pepsine, le
lysozyme, la ribonucléase, et peut être le plus notable, l’a-chymotrypsine. Bien que
cette situation soit moins manifeste qu’il y a 30 ans, la fréquence avec laquelle
l’a-chymotrypsine est rencontrée dans la littérature doit plus au fait que cet
enzyme est considéré comme un « enzyme typique », que par l’importance biologique qu’il peut avoir. Ces enzymes partagent certaines propriétés qui justifient
pleinement leur utilisation pour des études détaillées : ils sont très abondants,
facilement cristallisables, ils sont stables, monomériques, non-spécifiques et
peuvent être traités comme des enzymes à un seul substrat, puisque le second
substrat est l’eau. Néanmoins, toutes ces qualités les disqualifient en tant que
représentant un « enzyme typique », puisque les enzymes sont généralement
CINÉTIQUE ENZYMATIQUE
ceux faits à la fin du paragraphe 5.6.3. Le point essentiel consiste à inclure des
valeurs de [I] qui soient suffisamment élevées et nombreuses pour déterminer si la
vitesse tend ou non vers zéro lorsque la concentration d’inhibiteur approche de la
saturation.
Tableau 5.3 - Préparation des expériences d’inhibition
[I] 1+
[] I
K ic
1+
[] I
K iu
K m
app
Valeurs de [A]
0
0,5
1
2
5
10
20
1,0
1,25
1,5
2,0
3,5
6,0
11,0
1,0
1,05
1,1
1,2
1,5
2,0
3,0
1,0
1,2
1,4
1,7
2,3
3,0
3,7
0,2
0,2
0,2
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
1
1
1
1
1
1
1
2
2
2
2
2
2
2
5
5
5
5
5
5
5
10
10
10
10
10
20
20
20
20
50
Le tableau représente le choix de concentrations de substrat [A] nécessaire pour
déterminer les constantes d’inhibition K ic et K iu dans une expérience où les valeurs
approximatives sont les suivantes : K m = 1, K ic = 2 et K iu = 10, en unités arbitraires (bien que
les unités pour K iu et K ic sont les mêmes). Les valeurs suggérées pour [A] sont exprimées
dans les mêmes unités que K m , et sont choisies pour s’étaler d’environ 0,2 K m
app jusqu’à
environ 10 K m
app pour chaque valeur de la concentration d’inhibiteur [ I ].
5.8. EFFETS INHIBITEURS DES SUBSTRATS
5.8.1. Fixation non-productive
La majorité des informations dont nous disposons sur les propriétés générales des
enzymes a été obtenue par l’étude d’un petit groupe d’enzymes, les enzymes
extracellulaires catalysant des réactions d’hydrolyse, qui comprend la pepsine, le
lysozyme, la ribonucléase, et peut être le plus notable, l’a-chymotrypsine. Bien que
cette situation soit moins manifeste qu’il y a 30 ans, la fréquence avec laquelle
l’a-chymotrypsine est rencontrée dans la littérature doit plus au fait que cet
enzyme est considéré comme un « enzyme typique », que par l’importance biologique qu’il peut avoir. Ces enzymes partagent certaines propriétés qui justifient
pleinement leur utilisation pour des études détaillées : ils sont très abondants,
facilement cristallisables, ils sont stables, monomériques, non-spécifiques et
peuvent être traités comme des enzymes à un seul substrat, puisque le second
substrat est l’eau. Néanmoins, toutes ces qualités les disqualifient en tant que
représentant un « enzyme typique », puisque les enzymes sont généralement