4 – ASPECTS PRATIQUES DES ÉTUDES CINÉTIQUES
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utilisée dans l’équation de vitesse. Dès lors, il faut tracer la tangente à la courbe au
temps zéro et non la corde. Bien entendu, le recours à ces raffinements dans la
mesure de la vitesse initiale dépend de la précision souhaitée pour la mesure. Dans
le cas où la mesure est utilisée pour suivre les progrès de la purification d’un
enzyme, il n’est pas nécessaire d’obtenir une valeur extrêmement précise de la
vitesse initiale. Par contre, lors de l’étude cinétique de l’enzyme purifié, il est
souhaitable d’obtenir une mesure plus précise qu’en traçant à la main la tangente
au temps initial. Dans ces cas, une manière d’obtenir une mesure précise de la
vitesse initiale repose sur l’utilisation de l’équation intégrée (voir § 2.8).
Produit formé
(unités arbitraires)
15
Vraie tangente initiale
Pente = 5
Estimation à partir
des cinq premiers points
Pente = 3,25
Temps (unités arbitraires)
20
10
5
04 26
8
0
4.1 - Problèmes liés à l’estimation de la vitesse initiale
La droite continue passant par l’origine montre la vraie tangente initiale, qui a une pente
supérieure de plus de 50% à la droite en pointillés qui a été dessinée en traitant les cinq
premières valeurs expérimentales comme si elles faisaient partie d’une phase « linéaire »
hypothétique. En réalité, il n’y a pas de phase linéaire et l’évolution de la réaction est
courbe sur la totalité de la gamme de temps.
4.1.3. Amélioration de la linéarité d’un décours de réaction
Puisque la vitesse d’une réaction catalysée par un enzyme est directement proportionnelle à la concentration de cet enzyme, une propriété qui est facilement vérifiable expérimentalement, il est impossible de modifier la courbure d’un graphique
d’avancement en modifiant la concentration de l’enzyme : il est uniquement
possible de modifier l’échelle de temps sur laquelle se déroule la réaction et tout
autre changement apparent de la courbure n’est qu’illusion. En effet, cette propriété
est la base du test de l’inactivation de l’enzyme décrit dans le § 4.2. En pratique, il
est parfois avantageux de diminuer la concentration d’enzyme afin de diminuer la
quantité de produit formé durant la période entre le mélange des réactifs et le
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utilisée dans l’équation de vitesse. Dès lors, il faut tracer la tangente à la courbe au
temps zéro et non la corde. Bien entendu, le recours à ces raffinements dans la
mesure de la vitesse initiale dépend de la précision souhaitée pour la mesure. Dans
le cas où la mesure est utilisée pour suivre les progrès de la purification d’un
enzyme, il n’est pas nécessaire d’obtenir une valeur extrêmement précise de la
vitesse initiale. Par contre, lors de l’étude cinétique de l’enzyme purifié, il est
souhaitable d’obtenir une mesure plus précise qu’en traçant à la main la tangente
au temps initial. Dans ces cas, une manière d’obtenir une mesure précise de la
vitesse initiale repose sur l’utilisation de l’équation intégrée (voir § 2.8).
Produit formé
(unités arbitraires)
15
Vraie tangente initiale
Pente = 5
Estimation à partir
des cinq premiers points
Pente = 3,25
Temps (unités arbitraires)
20
10
5
04 26
8
0
4.1 - Problèmes liés à l’estimation de la vitesse initiale
La droite continue passant par l’origine montre la vraie tangente initiale, qui a une pente
supérieure de plus de 50% à la droite en pointillés qui a été dessinée en traitant les cinq
premières valeurs expérimentales comme si elles faisaient partie d’une phase « linéaire »
hypothétique. En réalité, il n’y a pas de phase linéaire et l’évolution de la réaction est
courbe sur la totalité de la gamme de temps.
4.1.3. Amélioration de la linéarité d’un décours de réaction
Puisque la vitesse d’une réaction catalysée par un enzyme est directement proportionnelle à la concentration de cet enzyme, une propriété qui est facilement vérifiable expérimentalement, il est impossible de modifier la courbure d’un graphique
d’avancement en modifiant la concentration de l’enzyme : il est uniquement
possible de modifier l’échelle de temps sur laquelle se déroule la réaction et tout
autre changement apparent de la courbure n’est qu’illusion. En effet, cette propriété
est la base du test de l’inactivation de l’enzyme décrit dans le § 4.2. En pratique, il
est parfois avantageux de diminuer la concentration d’enzyme afin de diminuer la
quantité de produit formé durant la période entre le mélange des réactifs et le