Matériels et méthodes
Extraction des substances actives
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- Puis dans second temps on procède l’isolement des saponines et des caroténoïdes par
plusieurs étapes de purification de l’extrait brut (voir partie II.4.1. et II.4.2).
II.2. Procédures d’extraction
Outre les procédés conventionnels d’extraction, d’autres procédés non conventionnels
peuvent être appliqués pour l’extraction des substances actives des Astéroïdae à savoir
l’extraction assistée par micro-onde (EAM), et l’extraction par ultrason (EAU). Ces méthodes
sont caractérisées par un temps d'extraction limité et une consommation réduite en solvants
nocifs et en énergie. De ce fait, l’un des objectifs de notre recherche est l’application de ces
processus dans l’extraction des saponines et des caroténoïdes des étoiles de mer étudiées afin
de maximiser les rendements d'extraction.
II.2.1. Extraction assistée par micro-ondes (EAM)
L’EAM est réalisée au moyen d’un four micro-onde multi-mode (NN-S674MF, Samsung,
Malaysia) dont les caractéristiques sont les suivantes:
- Fréquence de 2450kHz;
- Puissance de sortie maximale de 1000W avec une incrémentation de 100;
- Dimension de la cavité de chauffage est de (22,5 cm × 37,5 cm × 38,6 cm).
Le principe d’EAM est relativement simple, il consiste à placer le matériel biologique dans un
ballon placé à l’intérieur de l’enceinte microonde en ajoutant un solvant organique ou non.
Le chauffage de solvant par l’énergie des micro-ondes conduit au chauffage de la matrice
biologique par conduction.
Ce chauffage provoque l'expansion et la rupture des parois cellulaires libérant ainsi des
molécules à extraire dans le solvant (Spar Eskilsson et Bjorklund, 2000).
Le système de refroidissement à l’extérieur du four microonde permet la condensation de
solvant et son retour d’une façon continue à l’intérieur du ballon.
Afin de réaliser l’extraction par micro-onde 1 g de la matière première (poudre lyophilisée des
étoiles de mer) est placé dans un ballon fond plat, puis un volume équivalent de solvant
d’extraction est additionné. Le ballon est positionné dans la cavité du four de micro-onde et le
mélange est irradié par une certaine puissance et pendant un certain temps suivant les
conditions opératoires d’EAM reportés dans le tableau 9 pour l’étude préliminaire et le
tableau 21 pour l’optimisation de l’EAM.
L’extrait obtenu est filtré à l’aide d’un papier filtre Wattman n° 1 monté sur un buchner relié à
une pompe à vide, puis roto-évaporé pour éliminer le solvant. Le résidu récupéré est pesé pour
Extraction des substances actives
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- Puis dans second temps on procède l’isolement des saponines et des caroténoïdes par
plusieurs étapes de purification de l’extrait brut (voir partie II.4.1. et II.4.2).
II.2. Procédures d’extraction
Outre les procédés conventionnels d’extraction, d’autres procédés non conventionnels
peuvent être appliqués pour l’extraction des substances actives des Astéroïdae à savoir
l’extraction assistée par micro-onde (EAM), et l’extraction par ultrason (EAU). Ces méthodes
sont caractérisées par un temps d'extraction limité et une consommation réduite en solvants
nocifs et en énergie. De ce fait, l’un des objectifs de notre recherche est l’application de ces
processus dans l’extraction des saponines et des caroténoïdes des étoiles de mer étudiées afin
de maximiser les rendements d'extraction.
II.2.1. Extraction assistée par micro-ondes (EAM)
L’EAM est réalisée au moyen d’un four micro-onde multi-mode (NN-S674MF, Samsung,
Malaysia) dont les caractéristiques sont les suivantes:
- Fréquence de 2450kHz;
- Puissance de sortie maximale de 1000W avec une incrémentation de 100;
- Dimension de la cavité de chauffage est de (22,5 cm × 37,5 cm × 38,6 cm).
Le principe d’EAM est relativement simple, il consiste à placer le matériel biologique dans un
ballon placé à l’intérieur de l’enceinte microonde en ajoutant un solvant organique ou non.
Le chauffage de solvant par l’énergie des micro-ondes conduit au chauffage de la matrice
biologique par conduction.
Ce chauffage provoque l'expansion et la rupture des parois cellulaires libérant ainsi des
molécules à extraire dans le solvant (Spar Eskilsson et Bjorklund, 2000).
Le système de refroidissement à l’extérieur du four microonde permet la condensation de
solvant et son retour d’une façon continue à l’intérieur du ballon.
Afin de réaliser l’extraction par micro-onde 1 g de la matière première (poudre lyophilisée des
étoiles de mer) est placé dans un ballon fond plat, puis un volume équivalent de solvant
d’extraction est additionné. Le ballon est positionné dans la cavité du four de micro-onde et le
mélange est irradié par une certaine puissance et pendant un certain temps suivant les
conditions opératoires d’EAM reportés dans le tableau 9 pour l’étude préliminaire et le
tableau 21 pour l’optimisation de l’EAM.
L’extrait obtenu est filtré à l’aide d’un papier filtre Wattman n° 1 monté sur un buchner relié à
une pompe à vide, puis roto-évaporé pour éliminer le solvant. Le résidu récupéré est pesé pour