Matériels et méthodes
Extraction des substances actives
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II.4.2.1. Estimation de la teneur totale des caroténoïdes
La méthode généralement utilisée pour le dosage des caroténoïdes extraits d'une matrice
naturel est basée sur la spectrophotométrie d'absorption visible.
La spectrophotométrie permet de mesurer l’absorbance d’un composé à une longueur d’onde
donnée et d’estimer la concentration de ce composé en suivant la loi de Beer-Lambert:
𝐴 = ɛ ∗ 𝑙 ∗ 𝐶
(𝟖)
Avec :
A : absorbance à longueur d’onde du pic majeur;
ɛ : le coefficient d’absorption (d’extinction) molaire en L.mol
-1 .cm
-1
, ou d’absorption en
masse % (E
1% cm – absorbance d’une solution de 1 g.100 mL
-1 );
C : la concentration de la solution en (mol.L
-1 );
l : la largeur de cuve en cm.
Donc, la concentration des composés dans une solution est évaluée par l’absorption de la
solution à une longueur d’onde λ. Elle dépend de coefficient d’extinction:
𝐶(mol/L) =
A
ε. l
𝐶(mg/L) =
1000. A
E1%cm
(𝟗)
Le coefficient d’extinction molaire différent d’un caroténoïde à un autre. Dans le cas des
caroténoïdes non identifiés (ou un mélange de caroténoïdes) E
1% cm a été supposé égal à 2500,
et l’absorbance A est mesurée une longueur d’onde λ égale 450 nm (Machmudah et Goto,
2013).
Donc, la teneur des caroténoïdes totaux des étoiles de mer étudiées a été déterminée à l'aide
de l'équation (8), avec E
1% cm =2500, et A c’est l’absorbance à 450 nm.
Le schéma ci-après résume la procédure d’extraction des substances actives des étoiles de mer
étudiées et montre les étapes de purification permettant de récupérer les saponines et les
caroténoïdes (Fig. 17).
II.4.3. Estimation de rendement total d’extraction
Le rendement total d’extraction présente la quantité d’extraits bruts obtenus après chaque
procèdes d’extraction avant de procéder aux différentes étapes de purification et d’isolement
de saponines et de caroténoïdes (Fig. 17).