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BlOCHIMÏIE GÉNÉRALE. LES CONST‘ITUANTS
L’autoradiographie utilise les propriétés des composés radioactifs d’1mpres
sionner les émulsions photographiques sen31bles, pour marquer de grosses
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molécules comme le DNA qu’on peut ainsi observer au m1croscope electronique
ISOLEMÈNT ET CRITERES DE PURETÉ DES PROTEINES
La mise en solution réclame l’extraction par des solvants, aqueux leplus
souvent; la solution aura été traitée immédiatement ou après
froidquelques heures à 0 °C ou plus longtemps
à — 80 °C. Les protemes
Sont libérées des cellules par broyage mécamque (broyeur _de Latap1e, homo—
gééiseur de Potter et Elvehjem), congélat1on et décongélatmn, ultrasons.
ÉLIMINA TION DES MOLECULES NON PROTÉIQ UES ASSO CIÉEScr-z
C’est une phaSe diicile qui nécessite des procédés adaptés .à chaqueCs
particulier. Les sels sont éliminés par dialyse, ultraltratwn,
-
tion,.passage sur «tamis moléculaire». L’élirrnaüon de l’eau se fait parlyo.
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philiSati0n (g. 39) (sublimation sous Vide des solutions congelées de prote1nes)
ou
(g. 41).
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PIG. 39.— Lyophilisation. La solution est lyophilisée dans le flacon B.
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Les vapeurs d’eau sont condensées grâce au réfrigérant R et au v1de V.
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d’un produit P à tra‘v‘ersune membrane M.
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PROTEINÈ DÀNS UN MÉLANGE DE PROTEINES
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On a souvent à isoler une protéine, au milieu d’une centaine de composés,
avec—un rendementde flip. 100.
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L’autoradiographie utilise les propriétés des composés radioactifs d’1mpres
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ISOLEMÈNT ET CRITERES DE PURETÉ DES PROTEINES
La mise en solution réclame l’extraction par des solvants, aqueux leplus
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à — 80 °C. Les protemes
Sont libérées des cellules par broyage mécamque (broyeur _de Latap1e, homo—
gééiseur de Potter et Elvehjem), congélat1on et décongélatmn, ultrasons.
ÉLIMINA TION DES MOLECULES NON PROTÉIQ UES ASSO CIÉEScr-z
C’est une phaSe diicile qui nécessite des procédés adaptés .à chaqueCs
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