84.
BIOCHIMIE GÉNÉRALE. LES CONSTITUANTS
:
saccharose à très haute concentration. Les particules se fractionnent non en
_
fonction_de leur constante S, mais d’après leur den31te. C’est une
_
.
gation d’équilibre : la particule se, déplace Jusqu’a ce qu’elle atteigne un
:
liquide de même densité (isopycmque).
…
Le liquide de support peut être une solution de chlorure de césium, CSC],
de densité très élevée, 1,7 g/ml, dans laquelle est m1s en suspens1on ou dissout
le mélange à fractionner. Sous l’action,.de la force centrifuge, les 10ns Cs+
tendent à sédimenter et un gradient de concentration, donc de densrté, s’établit.
l
Les particules ou molécules qui y avaient été ajoutées se rassemblent en bandes - -
transversales selon leur densitépropre apparente. La méthode est utilisée pour
fractionner le DNA.
—
_
L’apparition et le déplacement d’une seule frontiere nette entre le solvant
«j‘:
et la solution qui s’enrichit en protéine sontlestémoins de l’existence d’une seule
g,;
-
protéine; si l’on observe plusieurs:.frontières,c’est que la protéine est
.:
fgè‘ne :.il ya plusieurs espèces ou plusieurs états moléculaires.
_
La vitesse de sédimetatioñ”est mesurée par‘un coefcient S en unités SvedS_= 1’><:1’0+13cm/sec;/dyne/g ; pour un solvant donné, la cons";
tante de sédimentation est une: caractéristique d’une protéine.
«
’
—ï j ‘ _
Le calcul du poids moléculaire M réclame— la détermination préalable de la
cons”tantede diffusion D (Svedberg).
=
où R .; la constante
.
‘
:
T -_= la température
'
S : la.:vitessede sédimentatiOn en
'
‘
V _= le volume Spécique…parüeldusolute
.
“
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=
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'
D =
constantede dusrondelaprotæœdans le solvant, sans application
.
d’un champ de grav1te.—
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..
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.
L’équilibredq
moins élevée et ne réclame
pas la'mesure de la constante
la mesure du P.M.
.où C1 est la concentration
d1stanceXl,
Cz, la concentration'à la distanœXz,
'”
‘
f
ce, la vitesse de rotation
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Le liquide de support peut être une solution de chlorure de césium, CSC],
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tendent à sédimenter et un gradient de concentration, donc de densrté, s’établit.
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Les particules ou molécules qui y avaient été ajoutées se rassemblent en bandes - -
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