'
_
PEPTIDES
'
67
011 lui préfère aUjourd’hui la méthode d—"Akabori. On effectue une hÿdrazinolyse par l’hydrazine
‘
"
-
"
…
.
H2N = NH2
'
'
'
_
H2N = NH/‘ÎH
.
'
,
-
'
-
—Nîl—CH—CO—l
'
Tous les acides aminés seront; retrouvés sous forme d’hydrazideS sauf le'
résidu C terminal qui reste intact.
.
‘
—
_
On utilise parfois l’hydrolyse ménagée par la carboxypeptidase qui libère le
premier puis successivement les autres acides aminés C terminaux (la carboxy—
peptidase A agit sur les acides aminés acides ou neutres, la Carboxypeptidase B
sur les acides aminés basiques).
'
l
'
'
Dans certains cas, on ne peut pas trouver de groupe terminal; il s’agit alors
d’un cyclo—peptide (exemple : gramicidîne}; Dans d’autres cas, l’analyse met
_
en évidence des ponts disulfures (—S+S—) : c’est le cas des hormones de la
_
post—hypophyse, qui sont des polypeptides, et aussi celui de l’insuline, qui est
une protéine à faible poids moléculaire.
.
-
'
'
'
.
La rupture des ponts disnlfurès peut s’eectuer par oxydation par l’acide
performique, HCOOOH ou par l’acide peodique
on obtient deux
peptides contenant chacun un résidu d’acide sulf0cystéique‘
_
—HN—cH;-c0—
-
'
__
'cH2
…
.
CH,…f
..
…
i
—
,
—
{
_Oxydation
_
+
‘
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-
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—
-
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s»
-
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SOSH
.
‘
—
‘
_
'
à…
,
.,
.
_.
_
'
HN—‘çH—CO—
'
par
réduction par lesmercaptans (—SH) comme
_
'
le thioglycol (l) qui-fdrn3e l’acide thioglycolique (2)
'
-
'
"
…Ë
“
”
.
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-
_
:
'
jgiiÏæ
.
-
—HN—CH—C°—
,
f
—H N—CH—CO—
—
’
-f
;
Pomev1terque1esSHnereformentdes
bloque …les” SH parl’acide -
iodo-æ1‘ééïçüùé RSH—l—ICHZCOOH—>R—S —CH2—-COOH + HL
,
[ 11
ou par chromamgraph1e
,
..
3D…………DELASEQŒNCEDESAcmEs…s
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