-
BUTS ET MÉTHODES DE LA BIOCHIMIE GÉNÉRALE
19
5
Mi
"
°
.
.
% â
7
_
t
>,<3
.
"
…
-.
‘
FIG. 8. — Chromatographie gazeuse.
1, 'au ede ression; 2, azv'
‘
'
-
—
'
*
'
."
-
s_itif_äaärog&uqn de 1»éîhanÊi‘îÏâäîÊÎÊ%ËËʣʔ€ÊäÊ5&ÊËÊ’Êâ’ä‘è’äïäf È d‘â"°‘
liquide stationnaire; 6, détecteur de thermocomductivité; 7, débit-mètre.
p ase
3° L’électropherèse. (Tiselius (l)) — a) A “ frontière mobile ”. — .La Solution
de protéines est introduite dans un tube en U et reliée dans chaque branche
du tube à une électrode, par l’intermédiaire d’une solution tampon de pH
'
bien dénâ:
Avant le passage du courant,
\
on passe
onc brusquement de la—concen—
\, —
,\
tration maximale en protéines à la con—
Æmm\
_
centration nulle (celle du tampon) ; cette
ËJË
"
’
…—
.
discontinuité s’objective, grâce à un dis”Ê,Ê
”\
>7/A
positif optique (fondé sur la mesure des
Sérum
g—: ' =Ï =Œ
‘a.
différences d’indices de réfraction), par
/
;
è '4‘{3'B
une « frontière» nette sur la plaque
%
‘
.__,_.
Y
graphique (g. 9aet b). Si la solution con—
.
â“ ’
'
tient deux protéines différentes, elles mi—
…a>
b)
°)
‘“
gr_eront
sous
l’inuence du champ élec—
Pro. 9.
sens
contraire si elles sont de
,
Électrophorèse àfrontière mobile.
charges différentes; mais même si leur
,
charge
est la même, la vitesse de migration de plusieurs protéines différentes
est différente. On_n’obtient donc pas une discontinütéùque de'concentration, mais plusieurs frontières correspondant chacüne_à—uné protéine (g. 9 c).
.
En réalité, du fait de la diusion qui se superpose
du
éléc'
tr1que, on observe non pas l’image d’une
mais celle d’un pic
:
.
‘
-
plus ou mdin$_ étalé
_'
_
_
‘
eÊ3®
1
b)
sf’éiÏectue sur
papier,
de cellulose, sur{ gélose,
.
.
@_@
,
sur bloc ou;sur.gel d’armdon ougsur
…
,“.
…
_…
-
pOlyacrylamide_ sur,une bande
papier
f
.
,
.
_
qualité
…“«“““-““““““".““““
'
…
-ÜQ®
3
estmrsedans
._
comportant deux cuv‘èS remplies‘d’ùûe so…
__
1u‘tiigm tampon(aPH<—=tœcentratmsalme
_
A
A
deS*Pa“
plersetdeselætmdæun “°9Œant.pëut
”
-
10. —Electrôphorèsé de.zone.' ams1parcoutlepaplerîmprégé
'dé 13 ‘
13 application
,
_de ‘il’éÏchantiudä 801ut10,1es '
21tphè3clton selon1eurvxtessede nngratmn
*
séchageuncolmrant xeet ‘côlOfe, “les P…f°
telnes(g IOet11Ï)ÿLeselectroph0resesSurgeldam1donetmleux n?” 861556
.
6) Lelectrophorese en couchesmzncewermet un meilleur rendemente
(1) Pr1XNObel
-
,
BUTS ET MÉTHODES DE LA BIOCHIMIE GÉNÉRALE
19
5
Mi
"
°
.
.
% â
7
_
t
>,<3
.
"
…
-.
‘
FIG. 8. — Chromatographie gazeuse.
1, 'au ede ression; 2, azv'
‘
'
-
—
'
*
'
."
-
s_itif_äaärog&uqn de 1»éîhanÊi‘îÏâäîÊÎÊ%ËËʣʔ€ÊäÊ5&ÊËÊ’Êâ’ä‘è’äïäf È d‘â"°‘
liquide stationnaire; 6, détecteur de thermocomductivité; 7, débit-mètre.
p ase
3° L’électropherèse. (Tiselius (l)) — a) A “ frontière mobile ”. — .La Solution
de protéines est introduite dans un tube en U et reliée dans chaque branche
du tube à une électrode, par l’intermédiaire d’une solution tampon de pH
'
bien dénâ:
Avant le passage du courant,
\
on passe
onc brusquement de la—concen—
\, —
,\
tration maximale en protéines à la con—
Æmm\
_
centration nulle (celle du tampon) ; cette
ËJË
"
’
…—
.
discontinuité s’objective, grâce à un dis”Ê,Ê
”\
>7/A
positif optique (fondé sur la mesure des
Sérum
g—: ' =Ï =Œ
‘a.
différences d’indices de réfraction), par
/
;
è '4‘{3'B
une « frontière» nette sur la plaque
%
‘
.__,_.
Y
graphique (g. 9aet b). Si la solution con—
.
â“ ’
'
tient deux protéines différentes, elles mi—
…a>
b)
°)
‘“
gr_eront
sous
l’inuence du champ élec—
Pro. 9.
sens
contraire si elles sont de
,
Électrophorèse àfrontière mobile.
charges différentes; mais même si leur
,
charge
est la même, la vitesse de migration de plusieurs protéines différentes
est différente. On_n’obtient donc pas une discontinütéùque de'concentration, mais plusieurs frontières correspondant chacüne_à—uné protéine (g. 9 c).
.
En réalité, du fait de la diusion qui se superpose
du
éléc'
tr1que, on observe non pas l’image d’une
mais celle d’un pic
:
.
‘
-
plus ou mdin$_ étalé
_'
_
_
‘
eÊ3®
1
b)
sf’éiÏectue sur
papier,
de cellulose, sur{ gélose,
.
.
@_@
,
sur bloc ou;sur.gel d’armdon ougsur
…
,“.
…
_…
-
pOlyacrylamide_ sur,une bande
papier
f
.
,
.
_
qualité
…“«“““-““““““".““““
'
…
-ÜQ®
3
estmrsedans
._
comportant deux cuv‘èS remplies‘d’ùûe so…
__
1u‘tiigm tampon(aPH<—=tœcentratmsalme
_
A
A
deS*Pa“
plersetdeselætmdæun “°9Œant.pëut
”
-
10. —Electrôphorèsé de.zone.' ams1parcoutlepaplerîmprégé
'dé 13 ‘
13 application
,
_de ‘il’éÏchantiudä 801ut10,1es '
21tphè3clton selon1eurvxtessede nngratmn
*
séchageuncolmrant xeet ‘côlOfe, “les P…f°
telnes(g IOet11Ï)ÿLeselectroph0resesSurgeldam1donetmleux n?” 861556
.
6) Lelectrophorese en couchesmzncewermet un meilleur rendemente
(1) Pr1XNObel
-
,