5.1 Quelques outils de base
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© Dunod – La photocopie non autorisée est un délit.
séquence d’ADN, il faut donc prendre des points de repère, c’est-à-dire
utiliser des sondes marquées (avec de la radioactivité ou sans radioactivité) connues, ce qui nous permettra de nous localiser. La partie haute
de la figure 40 montre l’aspect diffus, inutilisable, d’une électrophorèse
obtenue après coupure avec des enzymes de restriction, mais sans utilisation d’une sonde. Le nombre de bandes obtenues pour une si grande
molécule est beaucoup trop important pour pouvoir identifier chaque
bande.
La carte de restriction se fait au moyen d’une technique d’électrophorèse, appelée du nom de son inventeur P. Southern. Le « Southern
Figure 39 Enzymes de restriction.
La nomenclature retient pour définir ces enzymes le nom de
la souche bactérienne dont ils ont été extraits. Des exemples
des trois familles d’enzymes de restriction sont donnés : ceux
qui coupent des séquences palindromiques, ceux qui effectuent des coupures à bords francs, ceux enfin qui ne sont que
partiellement spécifiques.