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56 DéterminationdeK m etV max
Mots clés
K m , V max , Lineweaver et Burk, Hanes et Woolf, Eadie et Hofstee, Eisenthal et Cornish-Bowden
1. DÉTERMINER V max À PARTIR DE MESURES DE VITESSE INITIALE
Cinq mesures de vitesse initiale sont portées dans la figure A. Les cinq points, numérotés
dans l’ordre croissant des concentrations de substrat se disposent de part et d’autre de
la courbe théorique à laquelle ils devraient appartenir (V max = 1 et K m = 3, unités arbitraires). Ces cinq valeurs expérimentales se révèlent insuffisantes pour évaluer V max à
partir du graphe ci-dessous.
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1
0
2
4
6
8
10
12
14
16
[S]
v
A
1
2
3
4
5
V max
La courbe de saturation v = f[S] est une hyperbole équilatère qui admet pour asymptotes v = V max et [S] = –K m  ; il suffit d’introduire les données expérimentales dans un
programme de calcul par régression non linéaire approprié pour en déduire les valeurs
expérimentales de V max et K m . On peut toutefois préférer une méthode de détermination
graphique.
2. MÉTHODES DE DÉTERMINATION GRAPHIQUE DE V max ET K m
Nous nous limiterons aux quatre méthodes les plus utilisées. Les trois premières consistent à transformer l’équation de Michaelis de manière à obtenir l’équation d’une droite.
Dans chacune de ces trois méthodes, les données transformées, reportées dans un
système d’axes perpendiculaires, permettent de tracer une droite dont la pente et les
intersections avec les axes servent à déterminer V max et K m  ; on a coutume de désigner
ces méthodes par les patronymes des auteurs qui les ont popularisées :
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