2. Polarisation des composés biologiques usuels
Il faut distinguer ceux qui conduisent aisément à des anions ou à des cations. En effet,
pour des raisons pratiques, le choix de l’anode et de la cathode est déterminé par la
nature des ions dont on veut analyser les vitesses de migration.
• Composés engendrant des anions Ce sont pour l’essentiel des composés comportant
des fonctions du type acide carboxylique (R -C O -O H ), des thiols (R-SH) et des alcools
(R-OH).
• Composés engendrant des cations Ce sont généralement les bases aminées des
acides nucléiques en particulier, mais aussi l’histidine, les imidazoles et l’extrémité N
terminale des protéines.
3. Les supports d’électrophorèse
Les plus employés sont aisément fabriqués à l’aide de matières premières très accessibles, d’où des possibilités d’emploi massives. Ces supports doivent être stables en
milieu aqueux et supporter la tension appliquée sans modification de structure. On distingue : l’électrophorèse sur papier, sur acétate de cellulose et sur des gels. Ces derniers
sont constitués à partir d ’amidon, d’agarose (agar) ou de polymères insolubles comme
les polyacrylamides. L’électrophorèse sur gel est très utilisée en biologie, par exemple
pour analyser des mélanges de protéines.
4. Dosage de protéines
Supposons qu’après migration des composants d’un mélange d ’acides aminés, nous disposions d’une suite de taches séparées le long d’une ligne. L’analyse de ces taches permet
de caractériser les différents constituants. Il est évidemment possible de déposer au début,
sur d’autres lignes des composés de référence. A l’aide d’une étude optique des taches
il est possible d’accéder à un dosage des différents composants, leur concentration étant
proportionnelle à l’intensité de la tache.
T J
O
c
D
û
«JD
t H
O
CM
©
x z
ai
‘v_
>Q.
O
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5. Électrophorèse bidimensionnelle
Le principe en est simple. Supposons qu’à l’aide de certaines conditions expérimentales
(pH du milieu par exemple) un certain nombre de massifs soient séparés. En tournant
la plaque de 90°, il est possible de continuer la séparation de chaque tache dans de nouvelles conditions opératoires. Chaque tache initiale peut alors se séparer en engendrant
de nouvelles taches ce qui permet de repérer et de caractériser ainsi un beaucoup plus
grand nombre de composés. Cette technique peut également être utilisée en chromatographie sur plaque.
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Il faut distinguer ceux qui conduisent aisément à des anions ou à des cations. En effet,
pour des raisons pratiques, le choix de l’anode et de la cathode est déterminé par la
nature des ions dont on veut analyser les vitesses de migration.
• Composés engendrant des anions Ce sont pour l’essentiel des composés comportant
des fonctions du type acide carboxylique (R -C O -O H ), des thiols (R-SH) et des alcools
(R-OH).
• Composés engendrant des cations Ce sont généralement les bases aminées des
acides nucléiques en particulier, mais aussi l’histidine, les imidazoles et l’extrémité N
terminale des protéines.
3. Les supports d’électrophorèse
Les plus employés sont aisément fabriqués à l’aide de matières premières très accessibles, d’où des possibilités d’emploi massives. Ces supports doivent être stables en
milieu aqueux et supporter la tension appliquée sans modification de structure. On distingue : l’électrophorèse sur papier, sur acétate de cellulose et sur des gels. Ces derniers
sont constitués à partir d ’amidon, d’agarose (agar) ou de polymères insolubles comme
les polyacrylamides. L’électrophorèse sur gel est très utilisée en biologie, par exemple
pour analyser des mélanges de protéines.
4. Dosage de protéines
Supposons qu’après migration des composants d’un mélange d ’acides aminés, nous disposions d’une suite de taches séparées le long d’une ligne. L’analyse de ces taches permet
de caractériser les différents constituants. Il est évidemment possible de déposer au début,
sur d’autres lignes des composés de référence. A l’aide d’une étude optique des taches
il est possible d’accéder à un dosage des différents composants, leur concentration étant
proportionnelle à l’intensité de la tache.
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5. Électrophorèse bidimensionnelle
Le principe en est simple. Supposons qu’à l’aide de certaines conditions expérimentales
(pH du milieu par exemple) un certain nombre de massifs soient séparés. En tournant
la plaque de 90°, il est possible de continuer la séparation de chaque tache dans de nouvelles conditions opératoires. Chaque tache initiale peut alors se séparer en engendrant
de nouvelles taches ce qui permet de repérer et de caractériser ainsi un beaucoup plus
grand nombre de composés. Cette technique peut également être utilisée en chromatographie sur plaque.
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