T J
O
c
û
kD
T —I
O
rs l
en E
Q .
>CL
O
U
M Résine échangeuse d’anions
Le principe de son fonctionnement est le même que le précédent. Soit
la résine et
A“ Fanion associé. Nous avons le processus d’échange suivant
R^A- + M+B- ^ R+B- + M+ + ADans le mélange élué nous trouvons donc Fanion A" et le cation M^. Comme
précédemment, il est possible de séparer différents types de cations à mesure que
Félution avance.
2, Régénération des résines
Une fois que la résine employée a échangé ses ions d’origine, elle est saturée et il faut
la régénérer. Cette opération est relativement aisée et consiste à faire passer une solution d ’un acide ou d’une base adéquats pour échanger les ions fixés indésirables. Cette
opération doit être renouvelée à intervalles réguliers avec les résines destinées à purifier
l’eau. Ces résines fournissent de l’eau de qualité variable, souvent appelée « eau permutée » ou encore « eau millipore » où les anions et les cations présents ont été remplacés
par
et OH", les constituants de l’eau elle-même.
Utilisation en biologie
Les protéines comportent de très nombreux sites acides et basiques et dans un milieu
tampon donné et il est possible d’accentuer l’une de ces caractéristiques. De même F ARN
et F ADN présentent des sites basiques susceptibles d’interagir avec des résines de polarité
opposée. L’utilisation de la chromatographie à échange d’ions est donc appropriée pour la
séparation des différentes espèces. En faisant varier le pH ou la concentration de la phase
stationnaire, il est possible de séparer différents types de protéines. Cette méthode est très
employée car elle est menée à température ambiante, dans des milieux qui ne détruisent pas
les espèces étudiées.
407
Précédent

- 380/489

Suivant