cuivre préalablement recouvertes d’un fin film de
carbone, puis mises à sécher. Le «colorant» s’accumule autour des particules, créant une couche
opaque aux électrons ;on obtient ainsi une coloration de fond sur laquelle les objets à observer (si
possible disposés en une couche monoparticulaire)
se détachent en clair. De très forts grandissements
sont autorisés, de sorte que l’on voit même aisément la forme des molécules de protéines avec
cette méthode. C’est une technique de mise en
œuvre rapide et facile, particulièrement utilisée
par les virologistes (voir figure 3.11 et chapitre 15).
1.5.2. O MBRAGE MÉTALLIQUE
Les molécules ou les particules, dissoutes ou
suspendues dans l’eau, sont directement étalées à
la surface d’une grille carbonée pour la microscopie électronique. Le léger relief présenté par ces
particules après évaporation de l’eau est artificiellement accentué par vaporisation d’une très fine
couche métallique (or ou platine), à la surface de la
préparation. L’opération se déroule dans une
cloche où un vide poussé a été fait ;l a projection
de métal est réalisée sous un angle assez incliné
60
B IOLOGIE CELLULAIRE
eau +acide
phosphotungstique
bactéries
membrane support
membrane
support
membrane support
dépôt d’acide
phosphotungstique
dépôt d’acide
phosphotungstique
bactéries
eau +acide phosphotungstique
Figure 3.11
Principe de la coloration négative
Après évaporation du solvant contenant le «colorant» et
accumulation de ce dernier autour des particules ou des
cellules déposées sur une membrane-support, on obtient
un effet de halo permettant de voir ces particules en
négatif, en microscopie électronique.
(D’après A. Berkaloff et al. ; Biologie et physiologie cellulaire, Hermann).
Figure 3.12
Principe de l’ombrage métallique
Après évaporation du solvant contenant les particules
ou les cellules en suspension, celles-ci sont déposées sur
une membrane-support. On procède ensuite à une opération de vaporisation métallique latérale sous vide ;
celle-ci conduit à une accumulation localisée de métal
qui créera un effet «d’ombre portée » lors de l’examen en
microscopie électronique.
eau
bactéries
bactéries
membrane
support
membrane
support
membrane
support
membrane
support
couche métallique
vaporisation
métallique
eau
carbone, puis mises à sécher. Le «colorant» s’accumule autour des particules, créant une couche
opaque aux électrons ;on obtient ainsi une coloration de fond sur laquelle les objets à observer (si
possible disposés en une couche monoparticulaire)
se détachent en clair. De très forts grandissements
sont autorisés, de sorte que l’on voit même aisément la forme des molécules de protéines avec
cette méthode. C’est une technique de mise en
œuvre rapide et facile, particulièrement utilisée
par les virologistes (voir figure 3.11 et chapitre 15).
1.5.2. O MBRAGE MÉTALLIQUE
Les molécules ou les particules, dissoutes ou
suspendues dans l’eau, sont directement étalées à
la surface d’une grille carbonée pour la microscopie électronique. Le léger relief présenté par ces
particules après évaporation de l’eau est artificiellement accentué par vaporisation d’une très fine
couche métallique (or ou platine), à la surface de la
préparation. L’opération se déroule dans une
cloche où un vide poussé a été fait ;l a projection
de métal est réalisée sous un angle assez incliné
60
B IOLOGIE CELLULAIRE
eau +acide
phosphotungstique
bactéries
membrane support
membrane
support
membrane support
dépôt d’acide
phosphotungstique
dépôt d’acide
phosphotungstique
bactéries
eau +acide phosphotungstique
Figure 3.11
Principe de la coloration négative
Après évaporation du solvant contenant le «colorant» et
accumulation de ce dernier autour des particules ou des
cellules déposées sur une membrane-support, on obtient
un effet de halo permettant de voir ces particules en
négatif, en microscopie électronique.
(D’après A. Berkaloff et al. ; Biologie et physiologie cellulaire, Hermann).
Figure 3.12
Principe de l’ombrage métallique
Après évaporation du solvant contenant les particules
ou les cellules en suspension, celles-ci sont déposées sur
une membrane-support. On procède ensuite à une opération de vaporisation métallique latérale sous vide ;
celle-ci conduit à une accumulation localisée de métal
qui créera un effet «d’ombre portée » lors de l’examen en
microscopie électronique.
eau
bactéries
bactéries
membrane
support
membrane
support
membrane
support
membrane
support
couche métallique
vaporisation
métallique
eau