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Partie 1 • Méthodes séparatives
Les détecteurs spectrophotométriques peuvent être utilisés en mode gradient d’élution.
tr a je t
o p ti q u e
source UV
polychromatique
cuve
à circulation
barrette de diodes
réseau concave
Figure 2.22 Principe du détecteur à barrette de diodes.
La cellule de mesure est éclairée par une source polychromatique dans le proche UV/Vis.
La lumière transmise par l’échantillon est dispersée par un réseau à réflexion sur un
détecteur constitué par une rangée de diodes (plusieurs centaines), chacune permettant
de connaître l’absorbance moyenne sur un intervalle très étroit de longueur d’onde
(ex. 1 nm).
Les spectres successifs des composés élués par la phase mobile, captés en sortie de colonne, sont tout d’abord mis en mémoire par l’instrument au fur et à mesure de l’élution, pour
être traités ultérieurement par un logiciel adapté. On obtient des spectrochromatogrammes
souvent spectaculaires (fig. 2.23). Cette acquisition d’un grand nombre de spectres pour une
seule analyse accroît les potentialités de ces détecteurs qui se prêtent à de multiples usages,
telle la représentation topographique de la séparation effectuée, A = f (l, t) (diagrammes
d’isoabsorption).
absorbance
temps d'élution (min)
lo n g u e u rs d 'o n d e (n m )
Figure 2.23 – Représentation sous forme tridimensionnel, A = f(t, l), d’une séparation
chromatographique obtenue par une méthode d’enregistrement rapide
(reproduit avec l’autorisation de la société TSP instruments).
2.11.2 Détecteur spectrofluorimétrique
Les composés fluorescents réémettent sous forme de radiations lumineuses une fraction
plus ou moins grande du rayonnement de la source auquel ils sont soumis (cf. ch. 11).
Partie 1 • Méthodes séparatives
Les détecteurs spectrophotométriques peuvent être utilisés en mode gradient d’élution.
tr a je t
o p ti q u e
source UV
polychromatique
cuve
à circulation
barrette de diodes
réseau concave
Figure 2.22 Principe du détecteur à barrette de diodes.
La cellule de mesure est éclairée par une source polychromatique dans le proche UV/Vis.
La lumière transmise par l’échantillon est dispersée par un réseau à réflexion sur un
détecteur constitué par une rangée de diodes (plusieurs centaines), chacune permettant
de connaître l’absorbance moyenne sur un intervalle très étroit de longueur d’onde
(ex. 1 nm).
Les spectres successifs des composés élués par la phase mobile, captés en sortie de colonne, sont tout d’abord mis en mémoire par l’instrument au fur et à mesure de l’élution, pour
être traités ultérieurement par un logiciel adapté. On obtient des spectrochromatogrammes
souvent spectaculaires (fig. 2.23). Cette acquisition d’un grand nombre de spectres pour une
seule analyse accroît les potentialités de ces détecteurs qui se prêtent à de multiples usages,
telle la représentation topographique de la séparation effectuée, A = f (l, t) (diagrammes
d’isoabsorption).
absorbance
temps d'élution (min)
lo n g u e u rs d 'o n d e (n m )
Figure 2.23 – Représentation sous forme tridimensionnel, A = f(t, l), d’une séparation
chromatographique obtenue par une méthode d’enregistrement rapide
(reproduit avec l’autorisation de la société TSP instruments).
2.11.2 Détecteur spectrofluorimétrique
Les composés fluorescents réémettent sous forme de radiations lumineuses une fraction
plus ou moins grande du rayonnement de la source auquel ils sont soumis (cf. ch. 11).