2 • Chromatographie liquide haute performance
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POMPE
POMPE
Remplissage
de la boucle
Injection
dans la colonne
boucle
orifice
de remplissage
(seringue en 4)
vers la colonne
boucle
effluent
1
1
2
2
3
3
4
4
5
5
6
6
a
b
seringue
boucle
pompe
vers colonne
vers la colonne
Figure 2.5 Injection avec une boucle.
a) Remplissage de la boucle. Dans cette étape, la seringue est introduite à la position
n ◦ 4 ; b) injection dans la colonne (noter la nouvelle position de la manette). Vanne
modèle 7125. Les vannes sont motorisables (reproduit avec l’autorisation de la société
Rheodyne Inc.)
2.5 COLONNES
La colonne se présente comme un tube, le plus souvent en acier, dont la longueur et le
diamètre présentent des différences selon les modèles. Les colonnes « standard » dont le
diamètre interne (DI) est d’environ 4,5 mm et la longueur de 10 cm (fig. 2.6), sont de plus
en plus supplantées par des colonnes de plus faibles diamètres, baptisées narrow-bore (DI
2-4 mm), micro-bore (DI 1-2 mm), capillaires remplies (DI 0,1-1 mm). Ces modèles sont
apparus suite à l’évolution des phases stationnaires customisées et pour simplifier les problèmes de couplage avec la spectrométrie de masse (technique couplée CLHP/SM, cf. chapitre 16).
Toute application en chromatographie correspond avant tout à une séparation. La colonne
doit donc avoir une efficacité suffisante, sans pour autant qu’il soit utile d’avoir des performances plus que nécessaires. Une colonne courte permettra d’aller plus vite. Une colonne
étroite se traduira par une économie de phase mobile. Ainsi pour une colonne standard,
le débit est de l’ordre de 1 mL/min, alors qu’il tombe à quelques mL/min pour une colonne micro-bore, ce qui nécessite des pompes et des détecteurs adaptés – quelques gouttes
suffisant pour éluer tous les composés.
© Dunod – La photocopie non autorisée est un délit
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POMPE
POMPE
Remplissage
de la boucle
Injection
dans la colonne
boucle
orifice
de remplissage
(seringue en 4)
vers la colonne
boucle
effluent
1
1
2
2
3
3
4
4
5
5
6
6
a
b
seringue
boucle
pompe
vers colonne
vers la colonne
Figure 2.5 Injection avec une boucle.
a) Remplissage de la boucle. Dans cette étape, la seringue est introduite à la position
n ◦ 4 ; b) injection dans la colonne (noter la nouvelle position de la manette). Vanne
modèle 7125. Les vannes sont motorisables (reproduit avec l’autorisation de la société
Rheodyne Inc.)
2.5 COLONNES
La colonne se présente comme un tube, le plus souvent en acier, dont la longueur et le
diamètre présentent des différences selon les modèles. Les colonnes « standard » dont le
diamètre interne (DI) est d’environ 4,5 mm et la longueur de 10 cm (fig. 2.6), sont de plus
en plus supplantées par des colonnes de plus faibles diamètres, baptisées narrow-bore (DI
2-4 mm), micro-bore (DI 1-2 mm), capillaires remplies (DI 0,1-1 mm). Ces modèles sont
apparus suite à l’évolution des phases stationnaires customisées et pour simplifier les problèmes de couplage avec la spectrométrie de masse (technique couplée CLHP/SM, cf. chapitre 16).
Toute application en chromatographie correspond avant tout à une séparation. La colonne
doit donc avoir une efficacité suffisante, sans pour autant qu’il soit utile d’avoir des performances plus que nécessaires. Une colonne courte permettra d’aller plus vite. Une colonne
étroite se traduira par une économie de phase mobile. Ainsi pour une colonne standard,
le débit est de l’ordre de 1 mL/min, alors qu’il tombe à quelques mL/min pour une colonne micro-bore, ce qui nécessite des pompes et des détecteurs adaptés – quelques gouttes
suffisant pour éluer tous les composés.
© Dunod – La photocopie non autorisée est un délit