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Partie 1 • Méthodes séparatives
La colonne est souvent précédée d’une précolonne, dite colonne de garde, courte (0,4
à 1 cm), remplie de la même phase stationnaire, ce qui sert à retenir certaines impuretés
(fig. 2.6). On augmente ainsi la durée de vie de la colonne principale en préservant ses
performances.
1 - colonne
2 - précolonne
3 - disque fritté
4 - raccord
4
3
2
3
1
3
4
Figure 2.6 Colonne standard et précolonne de CLHP.
Aspects extérieurs éclatés et assemblés d’une colonne ZORBAX ® . La phase stationnaire
est maintenue par deux disques poreux situés à ses extrémités. La surface interne du
tube est rendue inerte par un traitement de passivation, ou par un chemisage de verre
ou de polymère PEEK ® ). La précolonne, périodiquement changée, évite le colmatage de
la colonne. Il n’empêche qu’il est conseillé de faire passer les échantillons avant analyse
à travers un filtre de porosité inférieure à 0,5 mm (reproduit avec l’autorisation de la
société RTI).
Les écarts de température modifiant les temps de rétention, les appareils actuels permettent de thermostater la colonne et l’éluant, à la fois pour assurer la répétitivité des analyses et pour faire intervenir éventuellement la température comme paramètre de séparation
(fig. 2.7).
0
10
20
min
a
b
c
Figure 2.7 Effet de la température de la colonne sur une séparation.
Exemple relatif à trois essais effectués sur un même mélange et avec un même débit de
phase mobile à des températures différentes (a) 25 ◦ C, (b) 35 ◦ C et (c) 45 ◦ C.
2.6 PHASES STATIONNAIRES
La recherche d’une bonne résolution chromatographique et par voie de conséquence d’une
efficacité élevée, a conduit à la création de phases stationnaires de nature et de structures
variées. Pour raccourcir les temps d’analyse, il faut tenter d’accélérer dans la colonne les
transferts entre les phases mobile et fixe.
Partie 1 • Méthodes séparatives
La colonne est souvent précédée d’une précolonne, dite colonne de garde, courte (0,4
à 1 cm), remplie de la même phase stationnaire, ce qui sert à retenir certaines impuretés
(fig. 2.6). On augmente ainsi la durée de vie de la colonne principale en préservant ses
performances.
1 - colonne
2 - précolonne
3 - disque fritté
4 - raccord
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Figure 2.6 Colonne standard et précolonne de CLHP.
Aspects extérieurs éclatés et assemblés d’une colonne ZORBAX ® . La phase stationnaire
est maintenue par deux disques poreux situés à ses extrémités. La surface interne du
tube est rendue inerte par un traitement de passivation, ou par un chemisage de verre
ou de polymère PEEK ® ). La précolonne, périodiquement changée, évite le colmatage de
la colonne. Il n’empêche qu’il est conseillé de faire passer les échantillons avant analyse
à travers un filtre de porosité inférieure à 0,5 mm (reproduit avec l’autorisation de la
société RTI).
Les écarts de température modifiant les temps de rétention, les appareils actuels permettent de thermostater la colonne et l’éluant, à la fois pour assurer la répétitivité des analyses et pour faire intervenir éventuellement la température comme paramètre de séparation
(fig. 2.7).
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Figure 2.7 Effet de la température de la colonne sur une séparation.
Exemple relatif à trois essais effectués sur un même mélange et avec un même débit de
phase mobile à des températures différentes (a) 25 ◦ C, (b) 35 ◦ C et (c) 45 ◦ C.
2.6 PHASES STATIONNAIRES
La recherche d’une bonne résolution chromatographique et par voie de conséquence d’une
efficacité élevée, a conduit à la création de phases stationnaires de nature et de structures
variées. Pour raccourcir les temps d’analyse, il faut tenter d’accélérer dans la colonne les
transferts entre les phases mobile et fixe.