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Partie 1 • Méthodes séparatives
Pour réaliser des gradients de phases mobiles, il faut plusieurs solvants. Si l’installation comporte une pompe unique, elle doit être précédée d’une chambre de mélange bassepression dans laquelle des électrovannes font rentrer les différents solvants selon un programme. Par opposition, d’autres installations comportent plusieurs pompes, spécialisées
chacune pour un ou deux solvants (pompes binaires), sachant que le mélange final est obtenu sous haute-pression, dans une sorte de té placé avant la colonne (fig. 2.3).
Lorsqu’on doit enchaîner plusieurs analyses on évite si possible de recourir à l’usage de
gradients, en recherchant un compromis de séparation réalisable avec un éluant de composition fixe. On réduit ainsi le temps de post-analyse qui sépare les analyses consécutives.
On considère en effet qu’avec un gradient, il faut, pour rééquilibrer les deux phases entre
elles avec la composition de départ, faire passer dans la colonne au moins 10 fois le volume
mort de l’installation.
2.4 INJECTEURS
L’injection d’un volume précis de l’échantillon en tête de colonne doit se faire en un temps
bref afin de perturber le moins possible le régime de circulation de la phase mobile qui doit
être stable de la colonne au détecteur. On utilise pour ce faire, une vanne haute pression à
plusieurs voies, manuelle ou motorisée dans le cas des injecteurs automatiques, placée juste
avant la colonne (fig. 2.4). Il s’agit d’une pièce de précision qui doit résister à des pressions
pouvant dépasser 30 000 kPa. Elle fonctionne en deux temps :
➤ Dans la position chargement, où seule la communication entre pompe et colonne est
assurée (fig. 2.5), l’échantillon est introduit à pression atmosphérique à l’aide d’une seringue dans un petit volume tubulaire appelé boucle. Celle-ci, dont il existe tout un choix
de volumes, est soit extérieure, soit intégrée dans le corps de la vanne.
➤ Dans la position injection, l’échantillon est inséré dans le flux de phase mobile par rotation de 60 ◦ d’un levier qui permet d’inverser le sens de circulation dans la boucle. Une
bonne reproductibilité des volumes n’est atteinte que si la boucle a été totalement remplie par l’échantillon. Le volume prélevé avec la seringue est donc toujours largement
supérieur à celui de la boucle.
assortiment de boucles
boucle
vanne manuelle
Figure 2.4 Vanne d’injection pour CLHP et boucles assorties.
Vanne vue de l’arrière (vanne à 6 entrées/sorties avec une boucle raccordée) et assortiment de boucles de différents volumes (reproduit avec l’autorisation de la société
Rheodyne Inc.).
Partie 1 • Méthodes séparatives
Pour réaliser des gradients de phases mobiles, il faut plusieurs solvants. Si l’installation comporte une pompe unique, elle doit être précédée d’une chambre de mélange bassepression dans laquelle des électrovannes font rentrer les différents solvants selon un programme. Par opposition, d’autres installations comportent plusieurs pompes, spécialisées
chacune pour un ou deux solvants (pompes binaires), sachant que le mélange final est obtenu sous haute-pression, dans une sorte de té placé avant la colonne (fig. 2.3).
Lorsqu’on doit enchaîner plusieurs analyses on évite si possible de recourir à l’usage de
gradients, en recherchant un compromis de séparation réalisable avec un éluant de composition fixe. On réduit ainsi le temps de post-analyse qui sépare les analyses consécutives.
On considère en effet qu’avec un gradient, il faut, pour rééquilibrer les deux phases entre
elles avec la composition de départ, faire passer dans la colonne au moins 10 fois le volume
mort de l’installation.
2.4 INJECTEURS
L’injection d’un volume précis de l’échantillon en tête de colonne doit se faire en un temps
bref afin de perturber le moins possible le régime de circulation de la phase mobile qui doit
être stable de la colonne au détecteur. On utilise pour ce faire, une vanne haute pression à
plusieurs voies, manuelle ou motorisée dans le cas des injecteurs automatiques, placée juste
avant la colonne (fig. 2.4). Il s’agit d’une pièce de précision qui doit résister à des pressions
pouvant dépasser 30 000 kPa. Elle fonctionne en deux temps :
➤ Dans la position chargement, où seule la communication entre pompe et colonne est
assurée (fig. 2.5), l’échantillon est introduit à pression atmosphérique à l’aide d’une seringue dans un petit volume tubulaire appelé boucle. Celle-ci, dont il existe tout un choix
de volumes, est soit extérieure, soit intégrée dans le corps de la vanne.
➤ Dans la position injection, l’échantillon est inséré dans le flux de phase mobile par rotation de 60 ◦ d’un levier qui permet d’inverser le sens de circulation dans la boucle. Une
bonne reproductibilité des volumes n’est atteinte que si la boucle a été totalement remplie par l’échantillon. Le volume prélevé avec la seringue est donc toujours largement
supérieur à celui de la boucle.
assortiment de boucles
boucle
vanne manuelle
Figure 2.4 Vanne d’injection pour CLHP et boucles assorties.
Vanne vue de l’arrière (vanne à 6 entrées/sorties avec une boucle raccordée) et assortiment de boucles de différents volumes (reproduit avec l’autorisation de la société
Rheodyne Inc.).